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专业： 生物技术 年级 201 专业： 生物技术 年级 2011级 学生姓名 敖佳琳 学号 2011210154 序号　　　　　 …………………………………………装……………………订……………………线…………………………………………………… 期末考试试卷（A）卷 课程名称 细胞工程 课程编号 任课教师 金烨 刘凯于 题型 植物 动物 总分 简答 分析 论述 综合 分值 30 20 30 20 100 得分 得分 评阅人 一、植物部分简答题(每题10分,30分) 简述植物细胞工程的应用。10分 脱毒苗生产，利用植物快速繁殖技术 脱毒苗生产，利用植物快速繁殖技术 植物改良，利用体细胞无性系技术 创造新的种质资源，利用原生质体培养和体细胞杂交技术 植物来源生物产品的生产，如人参皂甙、紫杉醇等 人工种子生产，利用植物胚胎培养技术 举例说明你对胚胎发生途径和器官发生途径的理解。10分 胚胎发生途径是指指外植体按胚胎发生方式形成再生植株的过程。 胚胎发生途径是指指外植体按胚胎发生方式形成再生植株的过程。在植物的有性生殖过程中，精子与卵子结合形成合子，尔后发育成胚，胚再进一步发育成完整的植株。兰花的组织培养过程中，经诱导之后，茎尖会逐渐增大而形成原球茎体，与兰花的胚胎正常发育相似。 器官发生途径是指在组织培养的过程中，再生植株不是通过胚胎，而是通过分生中心直接分化器官，最终形成完整植株的过程。通常情况下像草莓无菌苗的获取：采用牙尖分生组织经脱分化形成愈伤组织，进而再分化发育成不同的组织器官，最后形成完整植株。 有位同学配完MS液体培养基时，发现其中有一些沉淀，请分析可能的原因。10分 M MS液体培养基配方复杂，从培养基配方角度考虑，出现沉淀可能有以下个方面的原因： Mg2+、Ca2+、Fe3+等会与PO43-结合形成微溶或难溶物，加母液时没有有意调整加样顺序 调节pH时，所用的NaOH的浓度太高，又没有及时搅拌均匀，局部出现过碱性，产生Mg(OH)2及Ca(OH)2等沉淀 所用到的双蒸水没有达到要求，存在杂质 排除以上原因，操作者在配置时使用到的器皿不洁净以及灭菌过程温度、时长的设置不合适都有可能会是的配置的培养基产生沉淀。 得 分 评阅人 二、植物部分-分析题(20分) 配置MS固体、液体培养基诱导形成愈伤组织（流程图如下）以水稻、烟草的种子为原材料，采用植物愈伤组织诱导的方法建立 配置MS固体、液体培养基 诱导形成愈伤组织（流程图如下） 以水稻、烟草的种子为原材料，采用植物愈伤组织诱导的方法建立 烟草种子消毒（ 烟草种子消毒 （84#消毒→无菌水反复冲洗） 水稻种子去壳、消毒（95 水稻种子去壳、消毒 （95%酒精消毒→无菌水冲洗→ 25.0g/L的次氯酸钠浸泡→无菌水冲洗） 接种 （每瓶接种2~3粒） 接种（诱导愈伤组织形成的固体培养基中，每瓶接种5~10粒） 接种 （诱导愈伤组织形成的固体培养基中，每瓶接种5~10粒） 培养，得无菌苗 叶片消毒，切成小片 叶片消毒，切成小片 接种（每皿接种5 接种 （每皿接种5片） 培养（2 培养 （26℃，恒温培养箱避光培养） 愈伤组织 愈伤组织 反复继代培养 反复继代培养 愈伤组织离散重悬 愈伤组织离散重悬 液体悬浮，摇床振荡超松散愈伤组织 液体悬浮，摇床振荡 超松散愈伤组织 得分 评阅人 三、动物部分--问答题 (每题10分，共30分) 影响动物细胞体外增殖的环境因素主要包括温度、渗透压、pH及气体环境等。温度 影响动物细胞体外增殖的环境因素主要包括温度、渗透压、pH及气体环境等。 温度 温度是动物细胞在体外生存的基本条件之一，不同种类的动物细胞最适 生长温度是不同的。 渗透压 体外培养渗透压是依赖于溶液中离子和中性分子（蔗糖、葡萄糖等）浓 度，不同来源的细胞其所要求的渗透压是不相同的 。 pH 合适的酸碱度也是细胞生存的必要条件之一，一般来说，大多数哺乳动 物细胞的最适pH为7.2~7.4之间，如果低于6.5或者高于7.6都会对细胞 产生不利影响，较长时间在这种pH条件，细胞会衰老或死亡。 气相环境 体外培养细胞需要有一理想的气体环境，包括O2和CO2，且其浓度则需 要适当。多数细胞需要在有O2的条件下才能生长，CO2为细胞生长所需 要，同时又是细胞代谢的产物，并且与维持培养基的pH有关。体外培养 细胞采用开放培养时，其气体环境一般应为95%空气加5%CO2的混合气体。 淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤包括： 1、抗原制备； 2 淋巴细胞杂交瘤技