交叉配血实验(精).pptVIP

职业教育现代宠物技术教学资源库 交叉配血实验 ----转自枫桥夜泊的博客 一、概述 交叉配血实验用于检测贫血的受血者和供血者之间的血清型是否相容，用以预防受血动物输血后发生输血反应。 1．主测配血试验是检验受血者血清中是否有抗供血犬的红细胞抗体，如果有则不能输血。 主测配血试验：受血者血清+供血者红细胞 2．副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供血者血液进入受血者体内后很快被稀释。 副测配血试验：供血者血清+受血者红细胞 3．多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输过血的犬初次交叉配血试验显示相容性，但有一定的过敏率。除非在特别紧急的情况下，能做交叉配血试验的应该尽量做，以严格程序、确保受血犬的安全，同时减少医患纠纷。 4．曾经有受血经历的犬，在第二次输血前，即使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。 5．猫能产生自然同种抗体，所以在猫输血前必须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的血型，若主测配血试验不相合，受血猫可能为B型血，供血猫为A型血。若副测配血试验不相合，受血猫可能为A型血，供血猫为B型血。如果交叉配血试验相合，则供血猫和受血猫血型相同。猫的血液最好在需要输血时，现采血现输血，不要长期贮存。 二、交叉配血试验的具体操作方法 1.基本原理：用供血犬的红细胞泥与受血犬血清相结合，借以判断其凝集情况。具体操作是取供血犬的5%红细胞悬液与受血犬血清在主侧池反应；用供血犬的血清与受血犬的5%红细胞悬液在次侧池反应。（注意：在临床上，由于使用一次性标准血袋的缘故，无法做次侧池凝集反应。因为全血内已混合了抗凝剂。） 2.制作供血犬的5%红细胞悬液： ① 取供血犬的全血2毫升，加入0.2毫升抗凝剂（10%枸橼酸钠与全血的比例为1：9），手弹试管，混合均匀后置于天平上称重（使用同样的试管内加入生理盐水直至平衡），后置于离心机内，1500转/分钟，离心5分钟。取上清液（血浆）于另一试管中备用。（抗凝剂也可以选用草酸盐。0.1毫升可抗凝2.5毫升全血。） ② 试管内剩余的红细胞加8-10倍生理盐水颠倒混匀称重离心，再取上清液于另一试管中备用。如此洗涤三次，分离后成分为红细胞泥。 ③ 取已分离成功的红细胞泥0.2毫升加生理盐水3.8毫升，颠倒混匀数次即为5%的红细胞悬液。 3.制备受血犬的血清: 取受血犬的全血2毫升，称重离心。1500转/分钟，离心5分钟。取上清液置于另一试管中，再称重离心，同样1500转/分钟，离心5分钟。取上清液于另一试管中备用，受血犬的血清即制备完成。此时的血清因不含纤维蛋白，故可用于交叉配血试验。 4.凝集反应的判定： 取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升，滴于载玻片正中央。随后加入受血犬血清0.1毫升，用细大头针搅拌10余圈，于20—25℃的室温下静置20—30分钟。显微镜下观察凝集情况。 图：凝集现象，可见红细胞凝集（100倍和400倍） 正常情况下，红细胞遍布于整个视野，排列均匀，无结团、无凝集、无异常形态。此时可输血。如发现有异常的红细胞，有结团、成串、混乱排列等形态，应坚决不予输血，以免发生危险。 5.考虑到临床个别病例紧急，为了争取时间，缩短交叉配血试验的过程，我们总结了一个简单易行的办法：取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升加入受血犬血清0.1毫升，置于试管中，天平称平后，离心机1500转/分钟，离心5分钟。肉眼观察，手弹试管，注意有无红细胞结团现象即可。 职业教育现代宠物技术教学资源库