阿尔茨海默病脑内老年斑形成及机制探讨神经生物学专业论文.docxVIP

|1111舢l99 |1111舢l 99 学位论文版权使用授权书 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文， 允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内 容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科 学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》， 并通过网络向社会公众提供信息服务。 作者签名：—整竺导 ：±!二年尘月粤日 -一 一 一 -一-一-一 - -一- 一一 本研究受到伊利诺公共卫生部(Illinois 本研究受到伊利诺公共卫生部(Illinois Depanment of Public Health)、美国国立卫生研究院(1R21NS056371，NationalInstitute of Health)、美国老龄研究所校内项目(intramural program of the National Institute on Aging)、阿尔兹海默病和相关疾病中心(the Center for A1zheimer’s Disease and Related Disorders，CADRD)、认知及神经科 学整合型研究中心(Center for Integrated Research in Cognitive Neural Sciences，CIR—CNS)的支持。 感谢H．Cai、P Davies等为 我们提供Wang—BACE、Ap等抗体。 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 摘要 第一部分 BACE一1在AD病脑组织中的表达 目的：观察BACE．1在正常及阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease， AD)时的空间表达模式。 方法：收集AD或痴呆病史超过3年的病人17例，非痴呆病人 14例，不同年龄(22．34岁)恒河猴7只。首先运用尼氏染色、 bielschowsky银染、免疫组织化学及westem blot等方法对所收集材料 进行病理诊断及分组。进而对各组脑进行B一位点APP剪切酶．1(6一site APP cleavage e11zyme—l，BACE．1)免疫组织化学检测，观察BACE一1 在正常和异常脑内的空间表达模式。 结果：尼氏染色结果显示为结构清晰的人脑组织，老年斑和 p—Tau同时存在者为AD实验组，二者均不存在者为非AD对照组。 按以上标准分别将恒河猴分为老年组及正常组。分组结果显示AD实 验组和非AD对照组分别有7例，恒河猴老年组3例，正常组4例。 Wrestem blot结果显示，AD实验组p．Tau、淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)、不同分子量BACE一1及其p位点剪切产物的 蛋白表达相对于非AD对照组均有明显增加；恒河猴老年组脑内不同 分子量BACE．1蛋白含量显著高于正常组。BACE．1免疫组织化学染 色结果显示，非AD对照组及恒河猴正常组BACE．1的表达模式与正 常小鼠相似，即最强表达在嗅球及海马苔藓纤维，脑皮质内则主要分 布在神经毡内，表现为弱的类似背景染色。AD实验组及恒河猴老年 组脑内BACE一1表达出现异常上调，表现为大小不一、形状各异的斑 块样结构。 结论： BACE一1的异常表达增加可能参与了AD及老年恒河猴脑内淀粉 斑的形成 关键词：BACE．1，AD，痴呆，恒河猴，老年斑 博士学位论文 博士学位论文 中文摘要 第二部分BACE．1上调与A13I沉积以及失营养性 轴突病变之间的关系 目的：观察AD病人及AD样恒河猴脑内BACE．1上调与Ap沉 积以及失营养性轴突病变之间的关系，揭示AD时可能的老年斑形成 过程。 方法：对各组邻片进行免疫组织化学DAB双标及免疫荧光双标 观察其脑内BACE．1标记的失营养性神经突起与p淀粉样蛋白 (D—amyloid，AD)、APP、早老素(presenilin．1，PSl)等AD相关分子 之间的时空关系。另通过BACE．1与突触囊泡素(synaptophysin，SYN) 及微管相关蛋白．2(microtubule．associated protein一2，MAP．2)的免疫 双标确定失营养神经突起的性质。 结果：AD实验组免疫组织化学邻片结果显示脑内斑块少的样本 BACE—l、AB空间上完全匹配，而斑块多的样本Ap表达量明显高于 BACE．1；恒河猴老年组免疫荧光双标结果显示异常表达增加的 BACE．1定位于失营养性轴