远端缺血预处理对血清miRNA表达水平的影响及对心肌保护作用的研究.doc

远端缺血预处理对血清miRNA表达水 Ill 平的影响及对心肌保护作用的研究 ［摘要］目的观察远端缺血预处理对血清miRNA的表达水平的影响及对心 肌的保护作用。方法选择2012年7月~ 2013年12月本院收治的合并心力 衰竭的瓣膜病患者60例，随机分为对照组和观察组，各30例。两组患者入院 后行相关评估，麻醉诱导后，观察组患者行远端缺血预处理，对照组同样放置压 力带，但不进行充气,后建立体外循环并行手术。检测患者手术前、手术24 h 后患者血清肌钙蛋白1( cTnl)、月西钠素(BNP )、肌酸激酶同工酶(CK-MB ) 的变化；采用实时走量荧光PCR ( qRT-PCR )来测走miRNA的表达；观察两 组患者术后呼吸机使用时间、ICU停留时间，并采用超声心动图监测手术后7 d 左心室射血分数(LVEF )；记录两组患者术后心律失常评分及自动复跳率。结 果手术24 h后，两组患者生化指标较手术前均有所升高，但观察组升高程度不 及对照组，差异有统计学意义(P0.05 )；手术24 h后，两组患者miRNA表 达水平较手术前均有所升高,观察组miRNA-1升高程度不及对照组， miRNA-21. miRNA133a升高程度大于对照组z差异均有统计学意义 (Pv0.05 );观察组患者心律失常评分均小于对照组，手术中心脏复跳后LVEF 及自动复跳率均高于对照组,差异均有统计学意义(Pv0.05 ) o结论远端缺血 处理可减少再灌注后心肌损伤,产生一定的心肌保护作用,并有可能通过抑制 miRNA-1的表达、促进miRNA?￡3、miRNA-21的表达来发挥作用。 ［关键词］远端缺血处理；miRNA ;心肌损伤；再灌注；心律失常 体外循环技术使心脏手术成为可能，但其同时会造成心肌细胞的缺血、缺血 及再灌注损伤，进而引起心肌细胞凋亡，损伤心功能［1］。为改善体外循环过程 中对心肌保护，部分药物被用来减少心肌细胞的缺血再灌注损伤，但迄今为止尚 无明确的方法来改善体外循环的心肌保護过程［2］。缺血预处理(ischemic preconditioning , IPC )是一项内源性的适应性反应保护策略，它是通过简短 〃处理〃后的患者交替实行缺血/再灌注”以提高随后缺血损伤的抵抗能力［引。 〃处理〃后的患者 心脏可以更长时间的耐受缺血再灌注所产生的损伤,已在临床证实为一种有效的 内源性心肌保护策略。随后发现在远离心脏的组织及器官进行缺血预处理亦能产 生同样的心肌保护作用，将其称为远端预处理(remote ischemic preconditioning , RIPC ) ［4］,而 microRNA⑸是一类长度在 20-23 个核苗 酸片段的非编码小RNA分子，具有负性调节基因的作用，本硏究旨在观察远端 缺血预处理对瓣膜性心脏病患者血清中miRNA表达水平及心肌保护作用的影 响,为临床治疗提供依据,现报道如下。 1资料与方法 1.1 一般资料 本硏究经医院医学伦理委员会批准。选择2012年7月~ 2013年12月本 院收治的合并心力衰竭的瓣膜病患者60例，患者均完善术前检查及准备，进行 心功能及运动耐量评估。心功能评价依靠MRI和超声心动图检测，固定MRI操 作医生和超声心动图操作医生；运动耐量应用6 min步行试验。患者知晓本实 验研究,签署知情同意。纳入标准［6］:患者为瓣膜性心脏病，符合美国2006 年瓣膜性心脏病指南的［类和Ua类适应证；严重左室功能低下，MRI显示左室 EF30% ,超声心动图显示左室EF40% ;既往无频发室性心律失常,或存在恶 性室性心律失常病史；患者无认知障碍，依从性佳，可配合治疗以及参与系列功 能检查，愿意参加术后随访。排除标准：3个月内出现急性心梗;合并恶性肿瘤, 合并血液系统疾病，血液检查异常：白细胞计数S4 OOO/mL或nlO OOO/mL ,血 红蛋白S10 g/dL ,血小板计数S100 OOO/pL ;或凝血功能异常；不能进行MRI 检查；1年内参加其他药物的临床试验；严重肝肾疾病［AST ( GOT )100 IU/LZ 或ALT(GPT) 100 IU/L］,不能耐受试验;孕妇或处于哺乳期；即往有严重的 过敏反应病史；具有其他不适合临床试验的情况。将60例患者分为对照组和观 察组,每组30例。两组患者年龄、性别、病程、瓣膜病变类型等一般资料比较, 差异无统计学意义(P0.05 ) z具有可比性。见表le 1.2方法 1.2.1麻醉方式采用维库漠钱、咪达哩仑诱导，行气管插管，中心静脉及 橈动脉分别置管,连续监测患者生命指征及动脉血压,同时监测体温。手术时给 予异丙酚，速度维持在(4~6 )yg/( kg h )，间断给予芬太尼，速度维持在(8~ 10 ) pg/ ( kg-h ),同时吸入七