分光光度计260 280 260 230比值所代表意义.docVIP

分光光度计260/280 260/230比值所代表意义 核酸在波长 260 nm处有最高吸收峰。吸收紫外光的性质是 HYPERLINK /safecheck/index?url=x+Z5mMbGPAsY/M/Q/im9DR3tEqEFWbC4Yzg89xsWivTyNPjJgyGRFo185Mv6Zpi2K4qTjgNeQuFPhkSMA4BCOOm/fZdF8lDP40ePTcjE3P+qplBjQfoaAZIZ1jfQBUysdBouhpl2UkST6VlXt55MfD8rbOYypExIojBWaxt3Z4oYzRUTFI3g+feecw2hY4ufVfdkwJqFldMwPGbuJnYGNA== \t _blank 嘌呤环和嘧啶环的 HYPERLINK /safecheck/index?url=x+Z5mMbGPAsY/M/Q/im9DR3tEqEFWbC4Yzg89xsWivQppNfh/vJ1yQxAQ4en5/PdXUnmo5obLsEripOOA15C4U+GRIwDgEI46b99l0XyUM/jR49NyMTc/6qmUGNB+hoBkhnWN9AFTKx0Gi6GmXZSRJPpWVe3nkx8Pyts5jKkTEiiMFZrG3dnihjNFRMUjeD5955zDaFji59V92TAmoWV0zA8Zu4mdgY0 \t _blank 共轭双键系统所具有的，所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。但紫外法不能区分DNA和RNA，只能用来鉴定核酸的纯度和含量。 HYPERLINK /safecheck/index?url=x+Z5mMbGPAsY/M/Q/im9DR3tEqEFWbC4Yzg89xsWivRT4myWRBgWzd6vo/ChkBU7ZInIi4k8KEu5449mWp1SxBADVCHPuUFSTGH+WZuV+ecUBG6CY6mAz/PJ+Q6xATXvUCKmjygAj41BAWOHvGSESwgKOP3XYVxk1j2iiCzE5lAdGWOWAfKGyl9wZMp/UQ2nl8u8Vs6ONwB2Pah4egTNMg== \t _blank 蛋白质由于含有芳香 HYPERLINK /safecheck/index?url=x+Z5mMbGPAsY/M/Q/im9DR3tEqEFWbC4Yzg89xsWivT79x9iuwFQHMXapjX6MmGeZInIi4k8KEu5449mWp1SxBADVCHPuUFSTGH+WZuV+ecUBG6CY6mAz/PJ+Q6xATXvUCKmjygAj41BAWOHvGSESwgKOP3XYVxk1j2iiCzE5lAdGWOWAfKGyl9wZMp/UQ2nl8u8Vs6ONwB2Pah4egTNMg== \t _blank 氨基酸，因此也能吸收紫外光。通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处，在260nm处的吸收值公为核酸的十分之一或更低，故核酸样品中蛋白质含量较低时对核酸的紫外测定影响不大。 RNA的260nm与280nm吸收的比值在2.0以上；DNA的260nm与280nm吸收的比值则在1.9左右。当样品中蛋白质含量较高时比值即下降。如何避免吸光值漂移读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器， 表现出的吸光值漂移越大。事实上， HYPERLINK /safecheck/index?url=x+Z5mMbGPAsY/M/Q/im9DR3tEqEFWbC4Yzg89xsWivTERiJzDPy/4OKmlu+gPYesPjEAZnWySEVkiciLiTwoS7njj2ZanVLEEANUIc+5QVJMYf5Zm5X55xQEboJjqYDP88n5DrEBNe9QIqaPKACPjUEBY4e8ZIRLCAo4/ddhXGTWPaKILMTmUB0ZY5YB8obKX3Bkyn9RDaeXy7xWzo43AHY9qHh6BM0y \t _blank 分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。1.核酸本身物化性质溶解核酸的缓冲液的pH 值、离子浓度等在测试时，离子浓度太高也会导致读数漂移，因此建议使用pH 值一定、离子浓度较低的缓冲液（如TE）可大大稳定读数。核酸的吸光值受pH值和缓冲液离子浓度影响。只有在一定的pH值和低离子浓度的条件下（如10 mM Tris-HCl pH 8.0），才能得到精确的检测结果。水的pH值不稳定，可能导致检测误差。一些缓冲液在紫外范围内存在自身吸收，为了确保准确测量，请使用与悬浮或洗脱样品时相同的缓冲液。2.样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素，由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是