南开大学基因操作原理课件第十二章[1].pptVIP

一.概论 1、80年代完成第一个外源基因在植物中表达 2、后20年一百多个植物转化外源基因 3、依据土壤脓杆菌完成基因转移(只适用于双子叶植物(dicotyls),原生质体转染需要再生植株,再生技术只在少数植株中发展,像烟草,马铃薯,矮牵牛) 4、基因枪转移基因 5、植物病毒作植物基因工程载体 二.脓杆菌和植物基因工程 1、植物愈伤组织(Callus culture)和外植体培养 2、植物基因工程载体 1）冠婴病 (Crown-gall disease) 植物细胞的转化并不总需要细菌的存在，一定存在一个遗传因子，它能从细菌到植物转移。 1974年(Zaenen et al.)发现，能够诱导肿瘤的土壤农杆菌隐藏一个大质粒（140－235kb）,定名这个质粒是Ti质粒（Tumor inducing plasmid,Ti） 完整的Ti质粒在植物冠婴组织中很难发现，经常是Ti质粒一个特异的小片段，23kb左右，一般都整合在植物核DNA上，这种小片段称T－DNA(transfer DNA) T- DNA的结构和功能 Tml 未知 影响肿瘤大小 Tms 色氨酸-2-单氧化酶 合成植物生长素auxin 吲哚乙酰亚胺氢化酶 合成植物生长素auxin tmr 异戊基转移酶