粘虫甘油醛鄄3鄄磷酸脱氢酶基因cDNA的克隆尧序列分析及表达量检测.PDF

14 卷 6 期 生命科学研究 灾燥造援员4 晕燥援6 圆园10 年 12 月 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Dec. 圆园10 虫甘油醛3 磷酸脱氢酶基因cDNA 的克隆 序列 分析及表达量检测 1 2 2 1 1 3* 柯 阴 环 奚耕思 廉振民 ， ， 1. 陕西师范大学生命科学学院 中国陕西西安7 10062；2. 山西师范大学 生命科学学院 中国山西 临汾041004 ； ， 3. 延安大学 生命科学学院 中国陕西延安 716000 ） 摘 要院 运用RT PCR 和RACE 技术 以粘虫渊Mythimna separata渊Walker 冤冤cDNA 为模板 对甘油醛3 磷酸脱 氢酶渊glyceraldehyde 3 p hosp hate dehydrogenase GA PDH 冤基因进行克隆获得全长cDNA 序列 并利用生物信息 学方法 对GA PDH 全长 cDNA 序列及推测得到的 GAPDH 蛋白序列进行分析. 结果表明 获得的粘虫 GA PDH 基因cDNA 序列长度为 1 317 bp 其中包括80 bp 的5忆非编码区尧 238 bp 的3忆非编码区和999 bp 的 开放阅读框渊Open Reading Frame ORF冤 编码一个332 个氨基酸蛋白 具有GAPDH 蛋白家族的两个功能结 构域. 该GAPDH 蛋白理论相对分子质 为35.498 6 kDa 等电点为7.63 富含6 种类型的特定功能位点. 该 蛋白序列与其他动物GAPDH 蛋白序列具有77.4 %耀92.9 % 高度同源性. GA PDH 基因表达量检测结果显示 GA PDH 在粘虫6 种不同组织间表达 无显著差异 渊P 0.05 冤 表明GA PDH 可作为研究粘虫功能基因表达 分析的可靠内参基因. 该基因的cDNA 序列已经递交GenBank 并获得登录号为HM055756. 关键词院 粘虫曰 甘油醛3 磷酸脱氢酶基因曰 克隆 中图分类号院 Q785 曰 Q966 文献标识码院 A 文章编号院 1007 7847 渊20 10冤06 0485 07 Molecular Cloning ，Sequence and Expression Detection Analysis of Glyc eraldehyde 3 p hosp hate dehydrogenase Gene in Mythimna sep arata Walker ） LI Ke1 2 YIN Huan2 XI Geng si1 LIAN Zhen min1 3* 1. College of L if e Sciences ，Shaanxi Normal Unive rs ity ，Xi ’an 710062 ，Shaanxi ，China ；2. College of L if e Sciences ，Shanxi Normal Unive rs ity ，L inf en 04 1004，Shanxi ，China ；3. College o