2 FCM样品制备相关.pptVIP

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2019-02-19 发布于湖北
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2 FCM样品制备相关.ppt

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血液单细胞样品的制备淋巴细胞的制备 protocol: 上层为血浆层，中层为分离液层 (淋巴细胞所处的位置在血浆层与分离液层中间)，底层为红细胞，红细胞上为粒细胞血液单细胞样品的制备淋巴细胞的制备 protocol: 稀释全血分离液离心前离心后血浆淋巴细胞粒细胞红细胞用吸管将上层与中层之间的淋巴细胞吸出，收集到另一支离心管，用NS稀释至10ml，离心洗涤2次，每次均以1500rpm, 10min，弃上清后即得到纯度较高的淋巴细胞，但可有少量的单核细胞。血液单细胞样品的制备淋巴细胞的制备 protocol: 血液单细胞样品的制备淋巴细胞的制备 protocol: 5 70%冰乙醇固定，置4℃冰箱保存血液单细胞样品的制备淋巴细胞的制备 protocol: 血液单细胞样品的制备 Categorization: 1 淋巴细胞的制备 2 粒细胞的制备 3 单核细胞制备 4 骨髓细胞中白血病细胞的制备 5 网织红细胞的制备血液单细胞样品的制备粒细胞的制备 protocol: 1 用淋巴细胞分离液对细胞进行分层 2 粒细胞的比重较淋巴细胞稍大，因此经分离液分离后的粒细胞，分层于红细胞之上，分离液的底部血液单细胞样品的制备粒细胞的制备 protocol: 3 以吸管慢慢将粒细胞层吸出，置另一只离心管内，以5ml的 Hank′s液洗涤三次，每次离心沉淀1500rpm，10min 血液单细胞样品的制备粒细胞的制备 protocol: 4 在吸取粒细胞的同时常附带一些红细胞，因此需将红细胞去除，加入1.0ml低渗溶液，30- 40s 5 再以Hank′s液洗涤2次，即可获得纯度大于95%以上的粒细胞血液单细胞样品的制备 Categorization: 1 淋巴细胞的制备 2 粒细胞的制备 3 单核细胞制备 4 骨髓细胞中白血病细胞的制备 5 网织红细胞的制备血液单细胞样品的制备单核细胞的制备 protocol: 1 取肝素1000u/ml抗凝全血 3.0m1,加入3.0ml NS 将血稀释,均在无菌条件下操作 2 RPMI-1640培养液10.0ml,放入培养瓶内,将稀释血加入培养液中,混匀,与培养瓶接触面要大血液单细胞样品的制备单核细胞的制备 protocol: 3 放入37℃恒温箱内孵育30-40min, 取出培养瓶 ,将血倾倒掉,用NS培养瓶轻轻冲洗一次,以去掉残留的血液,这时培养瓶壁上贴附了大量的单核细胞,因为单核细胞具有短时培养期内贴附快的特点血液单细胞样品的制备单核细胞的制备