湖南师范大学（2019年 复试笔试科目） 学硕 二级学科 遗传学 考试科目名称：基因工程.docVIP

湖南师范大学硕士研究生入学考试复试题考试大纲 复试笔试科目 考试科目：基因工程 考试形式与试卷结构 考试时间 考试时间为180分钟。 答题方式 答题方式为闭卷、笔试。 试卷内容结构 基因工程 （90%） 心脏发育的基因调控 （10%） 题型结构 名词解释 10个 （30%） 填空题 20个 （20%） 简答题 5个 （50%） 考试内容与考试要求 基因工程部分 基因工程概述 基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的标志，基因工程有哪些主要应用？ 基因工程的工具酶和载体 1.基因工程的工具酶 基因工程的工具酶有哪些？限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA连接酶的作用， 碱性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的用途和作用等。 2. 基因工程的载体 基因工程载体必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征与基本结构，噬菌体载体有哪些类型，克隆载体有哪些类型？携带能力有多大？人工微小染色体的概念，标记基因的种类。什么是α互补？表达载体的概念与基本结构，T7噬菌体启动子系统的组成、融合蛋白表达系统的概念与载体结构，真核表达系统的载体组成，真核表达载体高效表达的实现条件，各种载体的结构特征与各结构的作用等。 目的基因的制备与鉴定 1.基因文库 基因组文库的概念，基因组文库的构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法等。 2.PCR技术 PCR技术的基本原理，PCR反应体系的主要成分，PCR反应主要程序，提高PCR反应特异性的措施。逆转录PCR、巢式PCR、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念和应用。 3.蛋白质工程 基因组数据库的概念，蛋白质工程的概念，PCR介导定点突变的原理。 4. 目的基因重组子的鉴定 核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法。Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理以及它们之间的相同点与不同点。 末端终止法DNA测序的基本原理，化学降解法测序的基本原理，DNA自动测序的基本原理等等。 基因工程在基因功能研究中的应用 1.基因表达谱的研究 胚胎原位杂交的概念，胚胎抗体染色的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程与应用。 2. 基因突变与基因敲除 转座子诱变的原理与优点，基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，RNA干扰的概念与分子机制，RNA干扰的优点与应用。基因过表达系统的组成，UAS-GAL4系统的组成与优点。 3.基因的相互作用研究 凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与组成、酵母双杂交系统的应用，免疫共沉淀的原理等。 转基因植物 1.转基因植物的制备 植物转基因的受体系统的类型，外源基因导入植物的方法， Ti质粒的结构特点， Ti质粒介导植物基因转移的过程。植物转基因载体的报告基因，提高外源基因在植物体内表达水平的策略。 2.转基因植物的现状 抗虫转基因植物的概念，抗除草剂转基因作物的概念。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。 转基因动物 转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。体细胞核移植法及其制备转基因动物的主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因动物的应用。转基因动物在医药科学研究中的应用。转基因小鼠的鉴定方法。