第六章细菌和六噬菌体的遗传重组.pptVIP

第六章   细菌和噬菌体的遗传重组 第一节 细菌杂交的关键因子 1、F因子(致育因子)的结构与功能 2、F因子在E·coli中的存在形式 整合(成为染色体的一部分） 高频重组品系（Hfr品系） ——与F-菌株杂交时,重组子出现的频率几乎比F+高上1000倍。 F- F+ Hfr F因子整合过程(P226) F因子的切离 第二节 细菌的连锁图 —— 把细菌染色体的相对基因位子标识出来 中断杂交 重组作图 1、中断杂交 第三节 噬菌体的遗传重组 （二）噬菌体作图 判断顺序 结论：T2噬菌体的连锁图是环状的 * * 三个基因丛： 原点 插入基因 转移基因 负责DNA的转移 与细菌结合有关 与性繖毛的形成有关 复制基因 trp复制蛋白 inc决定不相容基因 oriv复制起点 游离(与染色体相独立) F- F+ F因子的转移 接合（核酸内切酶） 断链向F- cell转移并复制 转移的链在F-中合成双链 DNA转移和合成完成， 连接酶封闭缺口 Hfr F- Thr+leu+azirtonrlac+gal+strs (2x107) X thr-leu-azistonslac-gal-strr (4x108) ↓ 肉汤培养液中通气培养 ↓ 定期取样（隔二分钟一次） ↓ 组织捣碎器搅拌 2‘ 4’ 6‘ 8’ 10‘ 12’ （鉴定菌落的基因型） MM+STR Hfr中非选择性标记进入F－所需时间 转移Hfr基因 时间 0 9 azir 9 azirtonr 11 azirtonrlac+ 18 azirtonrlac+galr 25 越早出现，越接近原点。 不是以1％重组值为图距，而是以时间为图距。 混合两种亲本后的时间 2、重组作图 供体仅仅提供一个染色体片段，而受体提供完整的染色体。 供体 受体 部分二倍体 （部分合子体） 外基因子 内基因子 （1）特点 只有偶次交换才能进行稳定的重组。 一次重组仅得一种重组子。 （2）作图 重组值＝重组子／总菌落数 X 100％ ＝lac-ade+／［(lac+ade+)+(lac-ade+)］ X 100% ＝22% Hfr品系不同主要是由于F因子插入的位置，方向不同，导致与F-杂交的起点不同。 （一）遗传重组现象 噬菌体T2的两对性状 h：寄主范围 h+ →E.coli B／(B/2) 噬菌斑半透明 突变型h →E.coli B／(B/2) 噬菌斑透明 r: 噬菌斑形态 r+ → 小噬菌斑，周围有朦胧光环 突变型r → 大噬菌斑，边缘清晰 hr+ X h+r （放在E.coliB平板上生长——混合感染） ↓ E.coliB ↓ 子代噬菌体→混合平板