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第一章 氨基酸与多肽化学 一、氨基酸 氨基酸是蛋白质水解的最终产物，是组成蛋白质的基本单位（构件分子）。 1、结构 除脯氨酸外，其他均具有如下结构通式 除了甘氨酸外，其他均具有不对称碳原子，具有旋光性。 2、分类 （1）根据R 基团化学结构分类 1）脂肪族 Ⅰ.侧链只是烃链 Ⅱ.侧链含有羟基 Ⅲ.侧链含硫原子 Ⅳ.侧链含有羧基或酰胺基 1 Ⅴ.侧链含有碱性基团 2 ）芳香族 3 ）杂环 （2 ）根据R 基团极性分类 1）非极性：Gly、Ala 、Val 、Leu 、Ile、Phe 、Pro 、Met 、Trp 2 ）极性：Thr、Ser、Tyr、Cys、Asn 、Gln ①带负电荷：Asp 、Glu ②带正电荷：Lys 、Arg 、His （3 ）根据酸碱性质分类 1）中性（一氨基一羧基） 2 ）碱性（二氨基一羧基）Lys 、Arg 、His 3 ）酸性（一氨基二羧基）Glu、Asp （4 ）根据营养学分类 1）必需 Met 、Trp、Lys 、Val 、Ile、Leu 、Phe、Thr 2 ）非必需 2 （5 ）不常见蛋白质氨基酸：在少数蛋白质中分离出一些不常见的氨基酸，这些氨基酸都是在蛋 白质合成后由相应的基本氨基酸衍生而来。如羟脯氨酸、羟赖氨酸、γ-羧基谷氨酸、N- 甲基甘 氨酸、磷酸丝氨酸 非蛋白质氨基酸：存在于生物体内，但不组成蛋白质的呈游离或结合态的氨基酸，约 150 种，具有多种生理功能。如β-丙氨酸、高丝氨酸、γ-氨基丁酸、L-瓜氨酸、L-鸟氨酸、牛磺酸。 3、性质 （1）氨基酸的构型和紫外光吸收 Trp 、Tyr 和 Phe 对紫外光有一定的吸收，因为分子中含有苯环，这三个氨基酸的光吸收都 在280 nm 附近。可以采用紫外分光光度计在280 nm 波长处测定最大吸收来测定蛋白质的含量。 （2 ）氨基酸的两性解离及等电点 等电点PI：在某一pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为 兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH 值称为该氨基酸 的等电点。 特点：净电荷数等于零，在电场中不移动；此时氨基酸的溶解度最小 等电点的确定：等于两性离子两侧pK 值的算术平均数 （3 ）化学反应 1）与HNO2 的反应 2 ）与茚三酮的反应 脯氨酸产生黄色物质，其它为蓝紫色。在 570nm （蓝紫色）或440nm （黄色）定量测定（0.5- 50μg/ml ）。 3 ）与甲醛反应：氨基酸的甲醛滴定法 4) 与2,4-二硝基氟苯（DNFB ）的颜色反应 鉴定多肽或蛋白质的 N-末端氨基酸。首先由 Sanger 应用确定了胰岛素的一级结构，又称为 Sanger 降解法。 5 ）与苯异硫氰酸酯（PITC ）的反应 用于N 末端分析，由Edman 于1950 年首先提出，又称Edman 降解法。 6 ）半胱氨酸的氧化与还原反应 3 4、氨基酸的分离纯化 （1）纸层析 原理：组成层析系统的固定相和流动相具有相反的极性。固定相为滤纸上的结合水(极性), 流动相为展层液（非极性有机溶剂）。被分析的样品中的各组分与固定相亲和力大者，易留滞于 原地，与流动相亲和力大者，易随流动相移动，因而达到分离的目的。 （2 ）薄层层析 （3 ）离子交换层析 原理：分离氨基酸时，用离子交换树脂作为支持物，利用离子交换树脂上的活性基团与溶 液中的离子进行交换反应，由于各种离子交换能力不同，与树脂结合的牢固程度就不同，在洗 脱过程中，各种离子以不同的速度移动，从而达到分离的目的。 （4 ）电泳 通过氨基酸在电场中泳动而达到分离各种氨基酸的技术 5、氨基酸的一般生产方法 （1）水解法 1）酸水解法：6~10mol/L 的盐酸，110~120℃，12~24h 2 ）碱水解法：4~6mol/L 的氢氧