含羟基化合物及其葡萄糖醛酸苷类反相高效液相色谱法保留指数预测.pdfVIP

含羟基化合物及其葡萄糖 醛酸苷类反相高效液相色谱法保留指数预测 栾连军 曾 苏 刘志强 浙（江医科大学药学系 杭州 310031） 提 要 采用体外孵育生物合成方法，获得葡萄糖醛酸苷类代谢物，并建立了其保留指数预测方法，在实验条 件下，误差小于12％ァ。 关键词 反相高效液相色谱法，保留指数，葡萄糖醛酸化，定量结构—色谱保留行为相关性 分类号 O658/R91 1 前言 日本岛津LC-6A型高效液相色谱仪，Shim- PackCLC-ODS柱 15cm×0.6cm i.d.,SPD-6AV 药物进入体内，经过一系列复杂代谢过程，最后 可变波长检测器及SPD-MIA二极管阵列检测器， 被排泄出体外，这一过程可以分为药物 Ｉ相代谢及 JouanMR1822自动高速冷冻离心机。 Ⅱ蛳相代谢。葡萄糖醛酸化反应是药物 Ⅱ蛳相代谢的主 要形式，其结果是母体药物与葡萄糖醛酸基结合，生 2.3实验方法 2.3.1流动相条件选择 成水溶性的葡萄糖醛酸苷类从尿中排泄。因此，Ⅱ蛳相 葡醛酸苷含有羧基，其pKa为3.0～3.3，为了 代谢是真正的解毒过程。代谢底物清除速率、代谢酶 达到电离抑制的目的，考察了不同pH值缓冲液对 活性的评价、药物毒副作用的评价等内容，都直接依 葡醛酸苷类保留时间t的影响。称取KH2PO4 赖于对生成的代谢物的测定。然而，由于缺乏代谢物 标准品，影响了此项工作的开展。国内有关这方面的 2.72g，溶于100mL去离子水，用磷酸调节pH值，得 研究尚属起步阶段。定量结构-色谱保留行为关系 到6种不同pH值 （1.84,2.04,2.26,3.29,4.50, 6.29）的缓冲液。流动相以甲醇 ：缓冲液 6（5:35， Q（SRR）研究虽已广泛开展，但是尚未涉及药物代 V/V）配制，流速为1.0mL/min，检测波长280nm。测 谢物，原因在于难以获得代谢物的系列化合物。本项 定了4种葡醛酸苷在不同流动相条件下的保留时间 研究采用体外孵育方法获取生物合成含羟基化合物 的葡萄糖醛酸苷代谢物，探讨了保留指数 I（）的预测 t，以pH-t作图（图1）。由图1可见，当pH值为2左 方法，建立了相应的预测方程。 右时，t基本处于一 “平台”状态，可认为电离基本得 到了抑制，故选定缓冲液pH值为2．20。 2 实验部分 2.1 样品 ⑴对硝基苯酚、⑵间硝基苯酚、⑶对苯基苯酚、 ⑷邻苯基苯酚、⑸邻甲基苯酚、⑹3，5-二甲基苯酚、 ⑺2，6-二甲基苯酚、⑻酚酞、⑼4-甲氧基-7-羟基香豆 素、⑽α-萘酚、⑾β-萘酚等均为AR级，⑿α-萘酚β- D-葡醛酸苷、⒀对硝基酚-β-D-葡醛酸苷、 -甲氧 基-7-羟基香豆素-β?-D-葡醛酸苷、⒂酚酞以及 βD- 葡醛酸苷、C3～C9甲基酮、尿苷二磷酸葡醛酸苷 U（DPGA）、Triton-100等购自Sigma公司。其它试 剂均为分析纯。 2.2 仪器 *本课题获国家自然科学基金资助 本文收稿日期：1996-03-0