使用PoroshellHPH-C18色谱柱分析在线衍生氨基酸-Agilent.PDF

使用 Poroshell HPH-C18 色谱柱分析在线 衍生氨基酸 应用简报 制药与食品检测 作者 摘要 陆予菲 本文采用安捷伦自动进样器进行自动化柱前在线衍生，结合具有表面多孔层填料的 安捷伦科技（中国）有限公司 Poroshell HPH-C18 色谱柱，建立了可实现快速和高灵敏度氨基酸定量分析的液相色谱 分析方法。此方法成功应用于在 种不同的样品基质中对 种氨基酸进行液相色谱分 3 23 离与准确测定。 前言 氨基酸的分析历来是色谱分析中的难点和热点，在食品、制药、生物等行业中都有相关 的应用。如何高效地分析不同种类的氨基酸，是分析工作者追求的重点。目前市场上的 方法均有各种缺陷，如色谱柱在高 下寿命低、分析效率低、所需试剂不易获取等问题。 pH 本文运用可靠的柱前在线衍生化反应，结合使用表面多孔层填料技术的 Poroshell HPH-C18 色谱柱，建立了液相色谱分析方法，其可成功实现对氨基酸的快速和高灵敏度的定量分 析。使用安捷伦自动进样器可轻松实现自动化在线衍生，其中一级氨基酸用邻苯二甲醛 、二级氨基酸用 芴甲基氯甲酸酯 进行衍生。 (OPA) 9- (FMOC) 实验部分 样品前处理 复方氨基酸注射液：精密量取样品溶液 ，置 容量瓶 1 mL 50 mL 仪器与试剂 中，加入 25 mL 0.1 mol/L 盐酸溶液，摇匀后加水稀释至刻度， Agilent 1260 Infinity 液相色谱系统，配备如下安捷伦组件： 摇匀，过 0.2 µm 滤膜，取续滤液待用。 G1312B 型二元泵，G1367D 型自动液体进样器，G1316A 型柱温 复方氨基酸片：取样品 片，研匀，精密称取相当于 片量的细 5 1 箱，G4212B 型二极管阵列检测器。 粉，置 15 mL 离心管中，加入 0.1 mol/L 盐酸溶液，超声使溶解， 过 滤膜。精密量取续滤液 ，置 量瓶中，加水 本实验选用的安捷伦色谱柱为：Agilent Poroshell