基因工程育种(硕士课程).pptVIP

技术路线 3. 采收后的子实体容易开伞，营养价值下降，口感差， 商业价值低 表达载体（pgVvs-mfc）的构建 草菇原生质体的制备与再生 草菇原生质体再生菌丝0℃低温致死时间的确定 0℃低温筛选获得草菇拟转化子 草菇拟转化子的PCR检测 草菇拟转化子的Southern杂交鉴定 基因组DNA的酶切 转基因草菇的多功能纤维素酶酶活 以稻草为诱导底物 转基因草菇的栽培及其生物学特性 转基因草菇的子实体发育 表5 转基因草菇的增产量 转基因草菇的孢子收集 转基因草菇的单孢分离及其后代遗传稳定性分析结果 单孢分离 F1 代转基因草菇的PCR鉴定 恢复生长情况 RG RG RD RD RD RD D D D 致死时间 24h 48h 72h 84h 96h 108h 120h 132h 144h 表1 草菇菌丝0℃致死时间的测定 注：RG为33℃培养能恢复生长； D为33℃培养不能恢复生长 图6 拟转化子0℃低温处理后恢复生长情况 图7 草菇拟转化子基因组DNA的PCR扩增结果(图未全附） 阳性质粒 V23-CK 水对照 基因组DNA的提取 图8 草菇转化子基因组DNA凝胶电泳结果 图9 草菇转化子基因组DNA的酶切