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临床检验的杀猪刀——血液时间
血液离体后在自然环境中很快就会凝固,离体血液会激活外源性凝血因子,它能使纤维蛋白原变为纤维蛋白从而导至血液凝固(内源性凝血就是血管内皮细胞受伤后破损释放出一些因子引起凝血)。血液离体后正常凝固析出的是血清,里面没有纤维蛋白原,而抗凝的血液放置一段时间或者经离心后得到的上清液是血浆,血浆里含有纤维蛋白原!
生化活性测定的影响
? ?? ???血样放置过久会导至某些生化成分改变,如白细胞降解作用、红细胞逐渐死亡;红细胞中的钾离子进入血清使血清钾升高;CO2逸散使其结果降低;血液pH值变化;酶活性降低或丧失等。
血糖测定的影响
? ?? ???红细胞消耗能量及细菌污染而分解葡萄糖使血糖浓度降低。GLU(血糖)在血样放置2~3小时后可降低6.7%~15%,故监测最好在2~3h内完成,6h即超出实验室可接受范围;BUN(尿素氮)、TBIL(总胆红素)、电解质的检测最好在采集后4~6h内完成检测;C02-CP(二氧化碳结合力)、K在6~24 h内逐渐升高;ALT(血清谷丙转氨酶)在6h后逐渐下降。
血小板计数的影响
? ?? ???血小板计数增高的原因可能有:①随着标本放置时间越长,细胞破坏越多,分析仪误将破碎的红细胞碎片计数为血小板;②由于血细胞在体外也会进行新陈代谢,使血浆渗透压和pH值发生了改变;③同时还与溶血剂的种类、稀释液的渗透压、离子强度、仪器等因素有关。因此所有标本应在60min内测定血小板,超过60min不能发报告。
hs-CRP测定的影响
? ?? ???将近70%的静脉抗凝血样品和末梢血样品在放置4℃、24h后hs-CRP测定值开始下降;随放置时间的增加hs-CRP测定值也在不断的下降,与即刻测定值比较偏移最大可达44%。但也有部分样品放置24h或7d后测得的hs-CRP值高于即刻测定值,最高的1例静脉抗凝血样品存放7d后增高81%。
cTnI测定的影响
? ?? ???标本因置放时间延长,cTnl的浓度水平衰减梯度不呈正态分布,这可能与cTnl半衰期有关。肌钙蛋白在循环血中的半衰期大约为数小时,由肾脏排出体外,而游离cTnI在循环血中的半衰期大约为67min,与cTnI在血液存在形式有关。cTnI测定应在20min内完成,40min和60min分别测试其水平就会有所下降。对于NT-proBNP,在样本放置24h内检测结果无变化,72h的检测结果无明显变化。
D-二聚体测定的影响
? ?? ???血液离体后血浆中凝血因子被活化且有纤溶酶被激活,从而导至交联纤维蛋白的形成并随之发生降解,会有D-二聚体的产生,所以随着血样放置时间的延长,D-二聚体的测量值也会不同程度的升高,在-20℃条件下保存的样本,7天之内测定D-二聚体结果均无变化;故对于检测D-二聚体的样本最好在4小时内完成,如不能及时出报告,应将血浆放置4℃冰箱保存但不宜超过24小时,24小时之内不能检测的标本须放在-20℃冷冻保存,这样才能保证检测结果的准确性。
PCT测定的影响
? ?? ???对于体外样本,采用不同的采血管、不同放置时间都会对PCT造成影响。样本放置12h时EDTA-K2管平均降解了(2.61±0.56)%,比较其他采血管,其降解速率最慢。分离胶管平均每小时降解0.46%,降解最快。在放置24h时,普通干燥管、分离胶管、肝素锂管、EDTA-K2管分别平均降解了(9.66±1.60)%、(11.01±1.62)%、(8.00±0.91)%、(3.86±0.76)%。放置72h时,分离胶管平均降解率达到(41.25±1.68)%,仍为降解最快,而EDTA-K2管则仅平均降解(15.77±1.65)%。EDTA-K2抗凝标本即使存放于4℃,在7d时与分离血浆即刻测定值差异无统计学意义;存放于-70℃,样本放置7d叠加反复冻融2次对测定结果无明显影响。
总结:
? ?? ???血样放置过久会导至某些生化成分改变及其标志物测定结果的改变,而现代发达科技能使血液样本的存放时间大大延长,但并不意味着存放时间长久对检测结果较好。一般说来未加促凝剂的血液离体后30min即可进行血清分离操作,加有促凝剂的血10min就能进行离心,抗凝血在抽血后可立即分离血浆。如果不能及时检验,则应按检测要求进行标本预处理。例如:血清分离后置2-4℃冰箱保存、制成去蛋白滤液、添加防腐剂等。需要注意血清冷藏前应移吸入另外的加塞试管,勿与血细胞共存,否则可引起溶血及其它误差因素。用于酶学检测的血清不宜反复冻融,此外还应注意保存时间不能太长,故实验室对血样的处理应根据其具体检验项目做出相应的明确规定。
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