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应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础
细胞的全能性
主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 提问: 1.细胞全能性概念?细胞具有全能性原因?各种细胞全能性大小的对比?生物体内细胞不能表现全能性的原因? 2.植物细胞表现全能性的条件?什么叫外植体及取材的注意事项? 3.用文字和箭头的形式表示植物组织培养的过程?植物组织培养的原理?脱分化、再分化的概念 4.植物组织培养过程中对光照如何处理?为什么? 5.植物组织培养培养基的成分?教材35页第1、2、3题? 6.用文字、箭头的形式表示植物体细胞杂交的过程?去壁的方法?促进原生质体融合的方法?原生质体融合后为什么要筛选? 7.原生质体融合完成的标志? 植物体细胞杂交完成的标志? 8.教材38页第一题? 9.植物体细胞杂交属于何种生殖方式?植物体细胞杂交形成的植物染色体数目如何? 10.植物组织培养的应用? 植物细胞表现出全能性的条件有哪些? 一、植物组织培养 细胞是活的 具有完整的细胞核 A、内部条件: B、外部条件: ① 离体培养 ② 提供营养物质 ③ 激素 ④其他适宜条件 如:水、无机盐、糖等有机物 如:生长素、细胞分裂素等 如:pH值、温度、无菌操作等 2、植物组织培养的过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 脱分化 植物激素: 细胞分裂素、生长素 植物体 根、芽 再分化 外植体 让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程. 愈伤组织是指一些已经分化的细胞,经过激素的诱导,形成的具有分生能力的薄壁细胞团。 切取 形成层 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 培养室 脱分化 再分化 胡萝卜的组织培养 (避光) 试管苗大规模培养 为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养? 思考 在有光时,往往容易形成维管组织,而不易形成愈伤组织。 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 激素 筛选 等量 激素 再分化 植物体细胞杂交过程示意图 杂种植株 再 分 化 植物细胞的融合 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 再生出细胞壁 杂种细胞AB 脱 分 化 愈伤组织 去壁 去壁 融合的原生质体AB 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 2、过程 二、植物体细胞杂交 3、成果和未解决的问题 成果:克服不同生物远缘杂交的障碍,出 现自然界没有的新品种。 未解决的问题:未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良性 状。 二、植物体细胞杂交 问题 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 主要原因是:生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 问题 自然界中有一种含有叶绿体的原生动物──眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。 植物细胞工程的实际应用 繁殖植物的新途径 微型育种 作物脱毒 人工种子 育种新方法 单倍体育种 诱导突变体 细胞产物的工厂化生产 概念:应用组织培养技术,快速繁殖植物(也叫快速繁殖技术) 原理:植物细胞的全能性 优点:繁殖率高,可大批量生产 取材少 培养周期短 保持优良性状 微型繁殖 作物脱毒 病毒在作物体内逐年积累,会导致作物产量降低,品质变差 分生区附近(茎尖、根尖)的病毒极少,甚至没有 采用茎尖进行组织培养 人工种子 结构: 人工薄膜+胚状体(不定芽、顶芽、腋芽) 优点: 不受气候、季节、地域的限制 保留优良性状 时间短,占地少 技术: 组织培养 原理: 细胞全能性 养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌 生长调节剂 单倍体育种 方法: 花药离体培养 技术: 组织培养获得单倍体 秋水素处理单倍体的幼苗,使染色体加倍
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