深部真菌快速定量检测-医院.pptVIP

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深部真菌[(1-3)-β-D-葡聚糖]快速定量检测 深部真菌感染 深部真菌感染简介 定义: 由致病性真菌所引起的人体深部感染,如侵及到皮肤深层和内脏,如肺、粘膜、肌肉、脑、消化道等器官,危害性较大,称为深部真菌感染。 类型: 目前,深部真菌感染已成为免疫功能低下患者发病和死亡最常见的原因。 常见有念珠菌病、孢子丝菌病、隐珠菌病、曲霉病、毛霉菌病、马尔尼菲青霉菌病、组织孢浆菌病以及球孢子、副球孢子菌等临床病症。 黑曲霉 深部真菌感染诱因 诱发因素:(1)慢性消耗性疾 病,如恶性肿瘤、糖尿病和尿 毒症等,可使机体免疫功能和抵抗力降低;(2)长期使用广谱抗生素,敏感的细菌被抑制,消除了正常菌群中与真菌相拮抗的细菌,使真菌得以大量繁殖。有些抗生素可促进某些真菌的生长,(3)肾上腺皮质激素可抑制炎症反应和纤维细胞增生,并可稳定细胞内溶酶体的膜,阻止其中酶的释放,影响中性粒细胞和巨噬细胞溶解杀灭微生物的作用。 (4)大剂量X线照射、抗肿瘤药物和免疫抑制剂都能抑制骨髓,使中性粒细胞和巨噬细胞减少,机体的免疫功能和抵抗力降低。(5)治疗用长时间静脉插管,留置导尿管和大手术,可引起局部损伤,成为真菌侵入的门户,在机体抵抗力低落时在体内繁殖致病。 深部真菌感染的诱因 深部真菌感染的特点 深部真菌感染诊治中的问题 深部真菌感染的临床检测 深部真菌感染的药物治疗 (1-3)-β-D-葡聚糖简介 1-3-β-D-葡聚糖本质及特点 (1-3)-β-D-葡聚糖特性 (1-3)-β-D-葡聚糖 定量测定 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的意义 早期诊断:深部真菌感染增多且复杂,早期症状无特异性,往往被原发病掩盖,病程长,发现较晚,死亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。 快速诊断:真菌感染就医的患者,往往病情严重,传统的微生物分离、培养与鉴定需要时间较长,患者在等待期间有可能病情加重,甚至死亡。 指导用药:快速确定真菌感染后,选择好治疗方案,有针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小,疗效高,价格适宜的药物提供准确的依据。 评价效果:应用抗真菌药物后,定期检测血浆中葡聚糖浓度变化,评价选用药物的有效性。 监护病程:监护深部真菌感染易感人群的病发状态。 动态观察:易感人群,临床疗效 动态浊度法原理 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的原理 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的设备 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的设备 MB-80 微生物快速动态测定系统:主机反应器,数据处理分析软件,计算机,打印机,电子恒温加热仪等。 国外检测仪器及试剂 日本生化学 Wellreader SK 603 国外-日本 日本和光 トキシノメーター MT-5500 Β-Glucan test Wako 国外-美国 ELx808?* Incubating Microplate Readers Glucatell? Kit (13)-β-D-glucan Detection 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的试剂盒 GKT- 5M Set动态真菌检测试剂盒:真菌反应主剂(用于各种体液中真菌检测)及样品处理液(样品处理液的目的排除体液中存在的各种测定干扰物质)各5支。 定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的附件 T01智能恒温仪 真菌检测专用真空采血管,采尿杯 无热原平底专用试管 MB-80的五大特点 快速---2个小时完成检测 动态---动态检测 定量---定量检测 灵敏---内毒素最低检测量1pg/ml (1-3)-β-D-葡聚糖最低检测量5pg/ml 肽聚糖(PGN)最低检测量20ng/ml 检测不受病人用药影响 MB-80的技术指标 灵敏度:最小检出值5pg/ml 精密度:批间CV10% 准确性:回收率平均75-125% 标准曲线范围:5-9000pg/ml 相关系数︱r︱≥0.980 检测速度快:2小时内完成 测定(1-3)-β-D-葡聚糖的参考值 真菌定量检测试剂盒GKT-5M Set(定量) (1-3)-β-D-葡聚糖临床判断阀值为10pg/ml。 检测值判读: 10pg/ml以下: 健康人值 10-20pg/ml间:真菌定植病变观察期 20pg/ml以上:深部真菌感染,需采用治疗。 敏感性与特异性为100% 使用MB-80的临床评价 取一份真菌性肺炎病人标本,重复测定10次,真菌葡聚糖的CV值为6.7%。 用公司提供的真菌葡聚糖标准品,测定5次,取均值然后计算相对误差为21.8%。 取真菌葡聚糖的标准品,按照公司提供的检测范围,从5000pg/ml开始做10倍稀释,共稀释5次,进行检测,做直线回归分析,相关系数(r)为0.901。 使用MB-80的临床评价 使用MB-80的临床评价 使用MB-8

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