注射用那屈肝素钙.PDF

注射用那屈肝素钙 ZhusheyongNaqugansugai Nadroparin Calcium for Injection 本品为那屈肝素钙的无菌冻干品。其抗Xa 因子效价应为标示量的90％～110％。 【性状】 本品为白色或类白色冻干块状物或粉末。 【鉴别】 （1）取本品，照效价测定项下方法试验，抗Xa 因子效价与抗Ⅱa 因子效价之比 应为2.5～4.0。 （2）本品的水溶液显钙盐的鉴别反应 （中国药典2015年版四部通则0301）。 【检查】 酸碱度 取本品，加水溶解并制成每1ml 中约含5000IU 的溶液，依法测定 （中 国药典2015年版四部通则0631），pH 值应为5.5～8.0。 溶液的澄清度与颜色 取本品，加水溶解并制成每1ml 中约含5000IU 的溶液，依法检查（中 国药典2015 年版四部通则0902 第一法与通则0901第一法），应澄清无色；如显色，与黄色2 号标准比色液比较，不得更深。 分子量与分子量分布 取本品内容物适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml 中含1500IU 的 溶液，作为供试品溶液；另取低分子肝素分子量对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每 1ml 中约含10mg 的溶液，作为对照品溶液。照分子排阻色谱法 （中国药典2015年版四部通则0514） 测定，以适合分离分子量为 15000～100000 蛋白的亲水性键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L 醋酸 铵溶液为流动相；流速为每分钟0.5ml；柱温30℃；示差折光检测器。取那屈肝素钙对照品适量， 加流动相溶解并稀释制成每1ml 中约含10mg 的溶液，取25μl，注入液相色谱仪，调整色谱系统， 使主峰与溶剂峰能够完全洗脱，重均分子量应在标示值的±150 范围内。取对照品溶液25μl，注 入液相色谱仪，记录色谱图。准确计算色谱图中那屈肝素钙峰的总面积 （不包括盐峰）及每个点 的累积峰面积百分比，确定与低分子肝素分子量对照品附带的宽分布标样表中累积峰面积百分比 最接近点的保留时间及对应的分子量，以保留时间为横坐标，分子量的对数值为纵坐标，使用 GPC 软件，拟合三次方程，建立校正曲线，相关系数应不小于0.990。再取供试品溶液25μl，注 入液相色谱仪，记录色谱图，按下式计算本品的重均分子量，应为3600～5000，分子量小于2000 的级分不得过总量的15.0％，分子量为2000～8000 的级分应为总量的75.0%～95.0％，分子量 为2000～4000 的级分应为总量的35.0%～55.0％。 Mw ∑(RIM)/ ∑RI i i i 式中 RI 为洗脱的i 级分的物质量，即示差色谱图的峰高；i M 由校正曲线计算得出的i 级分的分子量。i 游离硫酸盐 取本品，按标示量加水制成每 1ml 中含5000IU 的溶液，作为供试品原液；精 密量取适量，用流动相稀释制成每 1ml 中含 100IU 的溶液，离心后选用适宜滤膜滤过后作为供 试品溶液。精密量取硫酸根标准液[国家标准物质GBW （E）080267，标准值：100μg/ml]适量， 用流动相稀释制成每1ml 中各含硫酸根1μg、2μg、5μg、10μg 和20μg 的溶液，作为系列浓度对 照品溶液。照离子色谱法 （中国药典2015年版四部通则0513）测定。以烷醇季铵的乙基乙烯基 苯-二乙烯基苯树脂为填充剂 （如AS11阴离子交换柱，4mm×250mm，或性能相当的色谱柱）， 连接与分析柱填料相同的保护柱 （4mm×50mm）；以3.0mmol/L 碳酸钠溶液为流动相；流速为 每分钟2.0ml；采用配备有阴离子自动再生抑制器或适宜的化学抑制器的电导检测器。取草酸钠 适量，加流动相溶解并稀释制成每 1ml 中约含50μg 的溶液，取 1ml 与每 1ml 中含硫酸根 10μg 的对照品溶液3ml，置同一10ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取25μl 注入液相色谱仪， 调整色谱系统，硫酸根峰与草酸根峰的分离度应大于1.0；精密量取上述5种浓度的对照品溶液 各25μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品溶液的浓度与相应的峰面积计算线性回归 方程，相关系数 （r ）应不小于0.995；再