幽门螺杆菌抗体分型.ppt

2000年7月获得中检所新生物制品审评检验报告 2002年5月上海医疗器械质量监督检验中心的注册检验 2002年7月瑞金医院的临床试验报告 2002年7月长宁区中心医院的临床试验报告 2002年8月上海市药监局颁发医疗器械注册证 2003年12月国家药监局颁发医疗器械注册证 2005年6月和2007月7月北京医疗器械质量监督检验中心的注册检验 2007年12月获得国家科技进步二等奖。 2010年1月完成上海长海医院、青海省人民医院和吉林大学中日友谊医院临床试验。 2010年3月获得中国药品生物制品检定所 注册检验报告 2011年7月获得国家食品药品监督管理局 产品注册证 * * 免疫印迹技术：它与内切酶的发现和PCR基因扩增技术一起，在上世纪做为分子生物学领域三大发现之一。给人类生物工程带来了革命性进展。 基本原理：将提取的蛋白混合物先进行SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质按照分子量大小不同分离然后再转印至印迹膜，显色后按照显色带位置不同判断分子量多少和所含蛋白质数量，称为Southern blot。 其制造主要有三个工序： 将蛋白质经凝胶电泳按分子量大小不同依次分离； 将分离的组分转印到印迹膜上； 对转印到印迹膜的蛋白成分进行免疫学检测。 * 本产品是将CagA、VacA的菌体抗原利用聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白按分子量大小不同依次分开，再转印至印迹膜上。 　 采用酶联免疫反应技术，如果被检者血清有相应抗体则在抗原的相应位置出现显色区带，根据条带显色位置判断被检血清中各种HP抗体。 由抗体出现的种类不同推断HP类型，再根据显色带的强弱、消长可观察治疗效果，预测溃疡有无复发的可能性。 * * 蒸馏水 1000ul可调加样枪一支 10ul加样枪一支 吸嘴 500ml带盖瓶 摇床一台 * 在量杯中将浓缩洗涤液用蒸馏水按 1：10 的比例稀释成洗涤应用液。 每槽加入洗涤液1ml， 再加待测血清或全血10ul， 放在摇床上摇动30分钟。 取出反应槽，弃去槽中液体，并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体，每槽加入洗涤液1ml，摇动洗涤1分钟，弃去槽中液体，并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体，重复洗涤3次； 每槽加入洗涤应用液500ul，再加酶联试剂10ul，放在摇床上摇动30分钟。 同（ 3 ）洗涤3次。 加显色剂 0.5ml，5分钟后观察结果。 待质控带和阳性带显色清晰，弃去槽内液体，用流水（自来水或蒸馏水）冲洗后取出印迹膜，等干后对比《标准带》判断结果。 * * CagA抗体 + - VacA抗体 + - UreA抗体 + - UreB抗体 + - 1、质控带未出现：表示本次试验无效。 2、阴性结果：显色区带仅出现质控带，未见任何一条阳性 区带，表示被检者血清中无HP抗体。 3、Ⅱ型HP抗体阳性：仅UreA和UreB区带中任意一种或同 时出现，未见CagA、VacA区带。 4、Ⅰ型HP抗体阳性： CagA、VacA区带中任意一种或两种同时出现。 * 各种胃、十二指肠疾病：包括胃、十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃癌和胃淋巴瘤等； 非溃疡性消化不良； 缺铁性贫血口服铁剂治疗效果不佳者； 儿童消化不良或不明原因的生长发育迟缓者。 * 本产品检查无任何禁忌症，不需要空腹可随时进行采血检测。 * 本产品属于体外诊断试剂类产品，不直接使用人体，对人体不造成创伤性损害。 本产品为各种胃、十二指肠疾病的辅助诊断，任何疾病的诊断均需要结合临床病史资料综合判断。 * 1、室温大于20度小于37度 2、试剂盒使用前要平衡室温 3、加酶标的时候要换枪头 4、严格操作流程 * 国内唯一能检测HP分型的体外诊断试剂 能直接观察HP血清学毒性反应全貌，包括了CagA、VacA、尿素酶A和B 可多人份同时检测，整个时间仅需1.5小时 仅需10微升被检血清 特异性强（97.0%）；敏感性高（98.0%） * 吴水河，刘家双，张阳德，等。幽门螺杆菌 CagA、VacA抗体与胃十二指肠疾病的相关性研究。中国内镜杂志， 2003; 9(3): 11-13. 余悠悠，沈霞。现代免疫学杂志， 2004, 24(6): 511-513. 张玫 汤哲 周英智，等。北京地区老年人群幽门螺杆菌感染的血清流行病学研究中华流行病学杂志，2005；26（9）：687-689。 张玫，汤哲，汤欣，等. 社会因素对老年人群幽门螺杆菌感染的影响. 世界华人消化杂志 2005, 13(14): 1779-1780. 陈肖肖，尚世强，来庆和，等. 具有cagA、vacA 基因的幽门螺杆菌及其表达产物的研究. 中华儿科杂志