蛹虫草固态发酵人参产物的有效成分含量测定.pdfVIP

食用菌学报⑥2015．22(1)：41～46 DOI：J．cnki／1005—9873．2015．01．008 蛹虫草固态发酵人参产物的有效成分含量测定 闫梅霞1，张瑞1，逄世峰1，胡清秀2，曲正义1，王英平“ (1中国农业科学院特产研究所，吉林长春130112；2中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，北京100081) 摘要：以人参须(Panax 多糖、蛋白和总皂苷含量测定结果表明：发酵人参须的多糖、蛋白质、总皂苷含量均高于发酵前。利用超高压 液相色谱法测定发酵产物腺苷、虫草素、人参皂苷单体的含量，结果表明：发酵人参须中虫草素含量高，达 4．14 mg／g，远高于蛹虫草子实体和出草后基质，发酵人参须中有4种皂苷单体(Rbz、Rb。、Rc和Rd)含量高于 发酵前人参须，除含有发酵前基质的5种人参皂苷(Rb。、Rb：、Rbs、Rc和Rd)外还含有稀有皂苷Fz和Rg。。 关键词：固态发酵；人参皂苷；虫草素 militaris)是著名的药用菌株，保存于本实验室，经中国工业微生物菌种 蛹虫草(Cordyceps 菌，虫草素是其主要药效成分之一，存在于子实 保藏中心鉴定为蛹虫草菌株。 体、出草后的培养基和液态发酵产物中[1-a]。人1．2主要仪器与试剂 参(Panax 超声波清洗机TH一400BY(济宁天华超声电 ginseng)是我国传统名贵中药，人参皂 苷是其发挥药理作用的主要有效成分之一，目 子仪器有限公司)，紫外分光光度计Tu．1810型 前已分离得到的单体人参皂苷达50多种，各皂 (北京普析通用仪器有限责任公司)，杜马斯定氮 苷在人参中的含量和药理作用差别较大。人参 PerformanceChromato 色谱仪(Ultra 皂苷Rga与Fz称为稀有皂苷，Rga具有抑制癌细 Liquid 胞增殖的作用[4]，F。是二醇组皂苷转化为graphy，UPLC)Acquity 司)。腺苷、人参皂苷[Re、Rb。、Rb2、Rb3、Rc、 Compound—K的中问产物[5]。双向固态发酵是 药用菌以含有药效成分的底物进行固态发 Rd、F。、20(S)一Rg。]标准品购自四川维克奇生物 酵[6]，产物称菌质，伴随着发酵进行，底物中的 科技有限公司。虫草素购自广州宽林科技有限 药效成分发生变化，菌体生长产生丰富的次生 公司。葡萄糖、苯酚、硫酸、香草醛均为分析纯试 代谢产物，因此菌质中有效成分多而且复杂。 剂，甲醇、乙腈为色谱纯。超纯水为实验室自制。 本研究通过测定发酵产物中多糖、虫草素、腺 1．3液体菌种制作 苷、人参皂苷等成分的含量，为含有双重药效成 蛹虫草菌株试管种经PDA平板活化(23℃ 分菌质的制备提供参考，也为高含量药效成分 培养8d)，打孔器打孑L(直径4ram)，取3块菌块 的获得提供新思路。 接种于装有130 mL液体培养基(g／L：马铃薯 200、葡萄糖20)的250mL三角瓶中，22℃， 1材料与方法 160 r／min摇床培养7d，得液体菌种。 1．1材料 1．4双向固态发酵 人参须(吉林抚松4年生人参)购于吉林省 干燥人参须用小铡刀截为2～3cm长度，取 抚松万良人参市场，