细胞生物学竞赛.ppt

2、制样技术 1）超薄切片 电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机制作。 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。 2）负染技术 用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。 冰冻蚀刻 freeze-etching 细胞基本结构 Plant cell 细胞的形状和大小 Gram positive bacterial cell wall structure diagram 2、细胞膜：通常不形成内膜系统。一些行光合作用的原核生物，质膜具有与捕光反应有关的内褶。一些革兰氏阳性菌质膜内褶形成小管状结构，称为间体(mesosome) ，因其与DNA有联系，推测可能起DNA复制的支点作用。（31） 3、拟核：没有核膜，DNA分子裸露，所含的遗传信息量可编码2000~3000种蛋白质，空间构建十分精简。 4、核糖体： 约含5000~50000个。 部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中。 沉降系数为70S。。 由大亚单位(50S)与小亚单位(30S)组成。 30S的小亚单位对四环素与链霉素敏感，50S的大亚单位对红霉素与氯霉素敏感。 肺炎支原体 支原体 大小通常为0.2~0.3μm，可通过滤菌器。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性。细胞膜中胆固醇含量较多，约占36%，凡能作用于胆固醇的物质（如二性霉素B、皂素等）均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。 基因组为环状双链DNA，分子量小（仅有大肠杆菌的五分之一），合成与代谢很有限。肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构（terminal structure），能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面，与致病性有关。 古细菌 整合蛋白的跨膜结构域可以是1至多个疏水的α螺旋，形成亲水通道的整合蛋白跨膜区域有两种组成形式，一是由多个两性α螺旋组成亲水通道；二是由两性β折叠组成亲水通道。 外周蛋白靠离子键或其它较弱的键与膜表面的蛋白质分子或脂分子的亲水部分结合，因此只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来，有时很难区分整合蛋白和外周蛋白，主要是因为一个蛋白质可以由多个亚基构成，有的亚基为跨膜蛋白，有的则结合在膜的外部。 （一）、质膜的流动性 膜脂分子的运动 利用细胞融合技术观察蛋白质运动 第三节 细胞表面的分化 细胞表面的特化结构如：膜骨架、鞭毛和纤毛、微绒毛及细胞的变形足等等，分别与细胞形态的维持、细胞运动、细胞的物质交换等功能有关。 钙离子泵 Four types of ATP-powered pumps 细胞内吞较大的固体颗粒物质，如细菌、细胞碎片等，称为吞噬作用。 细胞吞入液体或极小的颗粒物质。 是存在于无脊椎动物上皮细胞的紧密连接。 连接蛋白呈梯子状排列，形状非常规则。 在果蝇中一种叫做discs-large的蛋白参与形成间壁连接，突变品种不仅不能形成间壁连接，还产生瘤突。 Adhesion Belt 各类连接的比较 细胞粘附分子 Cell Adhesion Molecule，CAM 为糖蛋白、分为五类，分子结构由三部分组成： 胞外区，N端部分，负责与配体识别； 跨膜区，多为单次跨膜； 胞质区，C端部分，与质膜下的骨架成分直接相连，或与胞内的信号分子相连。 多数细胞粘附分子依赖二价阳离子，如Ca2＋，Mg2＋。 细胞粘附分子的作用机制有三种模式： 亲同性粘附；两相邻细胞表面的同种CAM分子间的相互识别与结合 亲异性粘附；两相邻细胞表面的不同种CAM分子间的相互识别与结合 通过胞外连接分子相互识别与结合。 一、钙粘素cadherin 亲同性CAM，依赖Ca2＋。 胞外部分形成5个结构域，均含Ca2＋结合部位。 作用： 介导细胞连接：如E-钙粘素。 参与细胞分化：决定胚胎细胞间的粘附，影响细胞分化。 抑制细胞迁移： 二、选择素 选择素（selectin）属亲异性CAM；作用依赖于Ca2＋； 参与白细胞与脉管内皮细胞之间的识别与粘合； 已知选择素有三种：L选择素、E选择素及P选择素。 P选择素贮存于血小板及内皮细胞； E选择素存在于活化的血管内皮细胞表面； L选择素广泛存在于各种白细胞的表面，参与炎症部位白细胞的出脉管过程。 三、免疫球蛋白超家族 Ig-superfamily Ig-SF包括分子结构中含有免疫球蛋白（Ig）样结构域的所有分子，免疫球蛋白样结构域指借二硫键维系的两组反向平行的β折叠结构。 一般不依赖于Ca2＋，包括亲同性或亲异性CAM N-CAM存在于神经细胞。 Pe-CAM存在于血小板及大多数免疫细胞。 I-CAM