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《生物化学实验》教案 教师: 杨东升 学时:34(1学分) 专业: 理工学院03生工 第 3 周 第 1 讲 重点与难点 1.如何鉴别还原糖和非还原糖； 2.如何将非还原糖转化为还原糖。 主要内容与课堂安排 实验一 糖的化学性质 一、主要内容 （一）原理 淀粉和蔗糖缺乏自由醛基（苷羟基）无还原性。但在酸的作用下，淀粉和蔗糖很容易水解成为糊精及少量麦芽糖、葡萄糖，使之具有还原性。淀粉溶液遇碘呈蓝色。 （二）糖的还原性（与Benedict试剂反应） 取4支试管，各加1mlBenedict试剂，混合均匀后，分别加4滴2%葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及1%淀粉溶液，摇动均匀，将各试管同时放入沸水浴中加热2~3分钟，然后取出放在试管架上冷却，注意观察试管中溶液颜色变化，是否有红色沉淀生成。 （三）蔗糖水解 取2支试管，编号后，分别加1ml2%蔗糖和1~2ml蒸馏水，向甲管中加3~5滴2%硫酸溶液，乙管中加3~5滴蒸馏水，混合均匀，然后将两支试管同时放入沸水浴中加热10~15分钟，取出两支试管放在试管架上冷却，甲管用10%NaOH溶液中和至中性。再向甲乙管中各加1mlBenedict试剂，摇动均匀，将两支试管同时放入沸水浴中加热2~3分钟，观察甲、乙两管中颜色的变化，说明什么问题。 （四）淀粉与碘的作用 取一支试管加10滴1%淀粉溶液和1滴0.1%碘液，溶液立即出现蓝色，将试管放入沸水浴中加热5~10分钟，观察有何现象发生，然后取出试管，放置冷却，又有何变化。 （五）淀粉的水解 取1个小烧杯加10ml1%淀粉溶液和8滴浓盐酸，沸水浴中加热，每隔2~5分钟取出1小滴淀粉水解液在白瓷板上，滴1 滴0.1%碘液，注意观察其颜色的变化，直到无蓝色出现为止。冷却后，向小烧杯中逐滴加入20%NaOH溶液至弱碱性为止，此时，取出1ml淀粉水解液于1支试管中，1支试管加1ml 1%淀粉溶液，在此2支试管中分别加入Benedict试剂，摇动均匀后，将2支试管同时放入水浴中加热2~5分钟，观察颜色变化，说明什么？ 二、课堂安排 一人一组分工协作进行实验；注意仔细观察实验现象，准确记录实验数据；试管、移液管、吸管等不可交叉使用，以免糖液混淆，影响实验结果；要求实验前预习，并缴交预习报告和实验报告。 思考题与习题 淀粉遇碘实验为什么要在冷却后进行？ 《生物化学实验》教案 教师: 杨东升 学时:34(1学分) 专业: 理工学院03生工 第 4 周 第 2 讲 重点与难点 1. 原料应充分切碎； 2. 重复过滤至澄清，用95%酒精提取。 主要内容与课堂安排 实验二 果 胶（设计性实验） 一、主要内容 从果皮中提取果胶。 （一）原理 果胶可分为原果胶，果胶质和果胶酸三种，是高分子多糖衍生物，其基本结构是D-吡喃半乳糖醛酸，以α-1，4苷键结合，通常以部分甲酯化状态存在。果胶是一种优良的亲水胶体，果胶、糖、水的羟基之间极其丰富的氢键对果胶的结构起重要的作用，使果胶具有一定的刚度，食品工业利用果胶的这种性质来制造果酱、果冻、凝胶粉等。 各种果实、蔬菜、果胶含量丰富，尤其是柑桔类果皮中果胶含量高达1.5%~5.5%。 以稀酸水解果胶，使其羧基甲酯化程度降低而溶于水中，再用酒精沉淀提取。 （二）操作步骤 原料为香蕉皮或柑橘皮。 1．去除杂质；2．稀酸水解；3．过滤清洗；4．调整pH；5．提取称重、记录。自拟方案提取果胶。 提示1、去除杂质和稀酸水解要过程注意温度、时间；2、过滤清洗过程和提取称重过程要采用四层纱布；3、调整pH要注意温度。 二、课堂安排 一人一组进行实验；注意仔细观察实验现象，准确记录实验数据；要求实验前预习，并缴交预习报告和实验报告。 思考题与习题 果胶的工业用途？ 《生物化学实验》教案 教师: 杨东升 学时:34(1学分) 专业: 理工学院03生工 第 5 周 第 3 讲 重点与难点 1. 固体硫酸铵若加到过饱和则有结晶析出，与蛋白质沉淀混合； 2. 透析袋的制作； 3. 透析过程中搅拌蒸馏水能加快透析速度。 主要内容与课堂安排 实验三 蛋白质的盐析和透析 一、主要内容 （一）了解蛋白质的沉淀作用。 1.原理：向蛋白质溶液中加入中性盐至一定浓度，蛋白质即沉淀析出，这种作用称为盐析。 2.操作：(1)取10%鸡蛋白溶液5ml，加入等量饱和硫酸铵溶液，微微摇动试管，使溶液混合后静置数分钟，蛋白即析出。如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵溶液；(2)取少许沉淀混合物，加水稀释，观察沉淀是否会再溶解，另取剩余的混合物，加入过量的硫酸铵粉末，使其成为硫酸铵的饱和液，观察沉淀产生。 (二)蛋白质的透析 1.原理：蛋白质用盐析法沉淀分离后，需脱盐才能获得纯品，脱盐常用的方法为透析法 蛋白质在溶液中因其胶体质点直