重组铁蛋白的活性研究【毕业设计】.docVIP

- PAGE I - 本科毕业设计 （20_ _届） 重组铁蛋白的活性研究 所在学院 专业班级 食品质量与安全 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 目录 TOC \o 1-4 \h \u HYPERLINK \l _Toc19270 0 前言 1 HYPERLINK \l _Toc23102 1 材料和方法 2 HYPERLINK \l _Toc23137 ? 1.1 材料 2 HYPERLINK \l _Toc17416 ? 1.2 试剂 2 HYPERLINK \l _Toc13650 ? 1.3 仪器设备 3 HYPERLINK \l _Toc20838 ? 1.4 方法 3 HYPERLINK \l _Toc32065 1.4.1 重组蛋白的诱导表达 3 HYPERLINK \l _Toc18844 1.4.2 诱导表达产物的SDS电泳 3 HYPERLINK \l _Toc17461 分离胶的制备 3 HYPERLINK \l _Toc1824 浓缩胶的制备 3 HYPERLINK \l _Toc28972 样品制备 3 HYPERLINK \l _Toc31182 电泳 3 HYPERLINK \l _Toc11782 1.4.3 重组蛋白的大量表达及纯化 3 HYPERLINK \l _Toc28988 1.4.4 蛋白复性 4 HYPERLINK \l _Toc19389 1.4.5 活性检测 4 HYPERLINK \l _Toc25545 2 结果 5 HYPERLINK \l _Toc13800 ? 2.1 SDS—PAGE 5 HYPERLINK \l _Toc32247 ? 2.2 表达产物的纯化 5 HYPERLINK \l _Toc758 ? 2.3 复性及计算 5 HYPERLINK \l _Toc21280 3 讨论 6 HYPERLINK \l _Toc8479 ? 3.1 目的基因在原核细胞中的诱导表达 6 HYPERLINK \l _Toc10202 ? 3.2 表达产物的纯化 7 HYPERLINK \l _Toc31986 ? 3.3 复性及计算 7 HYPERLINK \l _Toc20354 4 结论 7 HYPERLINK \l _Toc31031 致谢 7 HYPERLINK \l _Toc4890 参考文献 8 PAGE 1 摘要：目的：获得了大量的有活性的重组铁蛋白，为进一步研究这一蛋白的功能和开发应用奠定了基础。方法：（1）重组铁蛋白的原核表达并用SDS—PAGE检测表达蛋白。（2）大量表达蛋白并用镍柱纯化法进行纯化。（3）进行蛋白复性使蛋白获得天然构象后，分析其活性。结论：该重组蛋白表现出明显的结合铁离子的活性，本实验为研究铁结合蛋白的功能和对其的开发应用奠定了基础。 关键词：重组铁蛋白；蛋白表达；活性研究 Abstract：Purpose:Obtained large number of active recombinant ferritin,contribute to further research of function and development applications.Methods:(1) Expression of recombinant ferritin and detection by SDS.(2)Express large number of protein and purified by nickel-column purification.(3)Refold the protein and then analyze the activity.Conclusion:Recombinant protein showe significant activity of binding iron.The function and mechanism of the foundation iron-binding protein can base on this study. Key words: Recombinant ferritin；Protein expression；Activity research 0 前言 铁蛋白(ferritin)于1937年由Laufberge从脊椎动物马的脾脏中纯化分离出来[1]，具有耐稀酸pH=2.1、