生化检验技术基础.ppt

二是利用一级反应，本法的基本要求是作为某一工具酶底物的待测物的浓度[S]必须远小于该工具酶的Km。此时反应速度基本上与[S]成正比，呈一级反应。 动力学法较终点法具有简便、省时、干扰少、可测定低浓度物质、不需样品对照以及易于自动化等优点，成为自动化分析的主要方法。但此法必须同时测定标准样品的反应速度，来推算未知样品中待测物的浓度。 2．酶活性测定的酶法分析 这类酶学分析法是用工具酶来测定待测酶的产物以求取待测酶的活性，适合于待测酶产物不能直接监测的情况。 也可有终点法和动力学法两种。 （1）终点法 将底物与待测酶反应一定时间后，终止反应，再用指示酶测定该时间内产物的生成量即可算出酶活性。 （2）偶联反应的基本动力学 S Ex P1 Ei P2 应先将样品与工具酶预保温，使样品中的内源性干扰物充分催化消耗，然后加入底物S起动反应。 起动后，因P从零开始升高，故工具酶反应速度也较低，不能代表待测酶反应速度，这一时期称为延滞期。 随着反应进行，进入恒态期，只要工具酶用量足够，就能正确地反映酶的活性. A 延迟期 恒态期 非恒态期 1.5