慢病毒介导的增强型绿色荧光蛋白报告基因对间充质干细胞的标记.PDFVIP

虫堡匿堂盘查!Q!Q笙§县!!旦筮塑鲞筮12翅塑丛M型!垦楚磐，丛璺!!§：垫!Q：!尘：墅：盟垒!窆 ·1357· ．基础研究． 慢病毒介导的增强型绿色荧光蛋白报告 基因对间充质干细胞的标记 李丹朱康顺周斌王劲颜荣华李征然孟晓春黄明声 姜在波单鸿 【摘要】 目的探讨慢病毒介导的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记问充质干细胞(MSC)是否 影响其细胞生物学特性，以及EGFP基因能否持久稳定表达。方法以不同病毒感染复数(MOI)实 行EGFP慢病毒对MSC的感染，通过流式细胞分析法(FACS)检测EGFP的阳性率，并在荧光显微镜 下观察EGFP在MSC的表达情况；通过锥虫蓝染色、Mrrr比色法、Hoechst染色和FACS检测细胞活 力、增殖、凋亡和周期；EGFP慢病毒感染MSC体外持续培养2、4、8、16周时通过FACS检测EGFP的 阳性率和荧光强度，以评价EGFP基因在MSc表达的稳定性。结果EGFP慢病毒以MOI=20感染 96 MSCh，EGFP阳性率达97．39％士0．68％；与对照MsC相比，EGFP慢病毒感染MSC时，对细胞活 力、增殖