丹参作用后人肾小管上皮细胞蛋白质组双向电泳技术的建立.docVIP

丹参作用后人肾小管上皮细胞蛋白质组双向电泳技术的建 1 了 魏聪1张春燕2肖斌2邵军2（通讯作者） （1泸州医学院附属屮医医院检验科四川泸州646000） （2泸州医学院生物化学教研室四川泸州646000） 【摘要】目的：建立丹参作用后人肾小管上皮细胞蛋白质组双向电泳分离 体系，提高其分辨率和重复性。方法：丹参作用于人肾小管上皮细胞，提取全蛋 白，按标准条件对蛋0质进行双向电泳分离，并对各个关键因素进行了优化。结 果:最终选择的裂解液配方是 1%TBP, 4%CHAPS, 0.2%Bio-Lyte, 40mmol/LTris, 8mol/L尿素，2mol/L硫脲；使用pH 4?7的IPG胶条，电泳参数根据Bio-Rad公 司的预设方案进行调整；改良硝酸银法进行蛋0质斑点染色。从而获得了满意的 蛋白质组双向电泳图谱。结论：成功建立了丹参作用后人肾小管上皮细胞蛋白质 组双向电泳分离体系，具有较高的分辨率和重复性，为进一步较为系统、全面、 准确的评价丹参及其复方制剂的作用机制和药效提供方法学基础。 【关键词】双向电泳蛋白质组丹参人肾小管上皮细胞 【中图分类号】R319 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752 （2014） 01-0097-02 Establishment of Two-dimensional Electrophoresis System for Proteome