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- | 1987-12-10 颁布
- | 1988-12-01 实施
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中华人 民共和 国国家标准
UDC 636.085
,543.062
饲料中黄曲霉素B:的测定方法 GB 8381一 87
Themethodofdetermination of
aflatoxinB,infeedstuff
本标准参照采用国际标准ISO6651-1983(E)《饲料中黄曲霉素B,的测定方法》。
1 适用范围
本标准适用于各种单一饲料和配合饲料。
2 原理
样品中黄曲霉素B,经提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后 在波长365nm紫外灯光下产生蓝紫
色荧光,根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。
3 试剂
3 1 三氯甲烷(GB682- 78),
2 3 正己烷(HG3- 1003-76).
3 5 . 甲醉(GB683- 79),
4 5 . 苯(GB690- 77),
抓 乙睛(HGB3329-60)。
6 3 无水乙醚或乙醚经无水硫酸钠脱水(HGB1002-76),
3 7 丙酮(GB686- 78)
以上试剂于试验时先进行一次试剂空白试验,如不干扰测定即可使用。否则需逐一检查进行重蒸。
3.8 苯一乙腋混合液:量取98ml,苯,加2mL乙睛混匀。
3.9 三氯甲烷一甲醇混合液:取97ml,三抓甲烷,3ml,甲醉混匀。
3.10 硅胶:柱层析用80 200目。
3.11硅胶G;薄层色谱用。
3.12 三氟乙酸。
3.13 无水硫酸钠(HG3- 123-76),
3.14 硅藻土。
3.15 黄曲霉毒素B,标准溶液
3.15.1 仪器校正:测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数,以求出使用仪器的校正因素:精密称取25mg
经千燥的重铬酸钾(基准级)。用。.009mol/L硫酸溶解后准确稀释至200ml,(相当于0.0004mol/L的
溶液) 再吸取25ml.此稀释液于50ml,容量瓶中,加。.009mol/L硫酸稀释至刻度 (相当于
0.0002mol/L溶液)。再吸取25mL此稀释液于50ml.容量瓶中,力J0.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当
于0.0001mol/L溶液)。用lcm石英杯,在最大吸收峰的波长处(接近350nm)用0.009mo1/L硫酸作空
白,测得以上三种不同浓度的摩尔溶液的吸光度。并按下式计算出以上三种浓度的摩尔消光系数的平
中华人民共和国农牧渔业部1987一11一20批准 1988一12一01实施
GB8381一87
均值。
F.=二
式中:F一一重铬酸钾溶液的摩尔消光系数;
A 一测得重铬酸钾溶液的吸光度;
”一一重铬酸钾溶液的摩尔浓度
再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较,按下式求出使用仪器的校正因素。
了- 3M160 ·(2)
式中:f-一使用仪器的校正因素;
M-一测得重铬酸钾摩尔消光系数平均值。
若f大于。.95或小于1.05,则使用仪器的校正因素可略而不计。
3.15.2 10pg/mL黄曲霉毒素B、标准溶液的制备:精密称取1mg-1.2mg黄曲霉毒素B,标准品,
先加入2mL的乙睛溶解后,再用苯稀释至 100mL,置于4℃冰箱保存。
用紫外分光光度计Mali此标准溶液的最大吸收峰的波长及该迪长的吸光度值,并按下式计算该标准
溶液的浓度。
X,=AXMXE,1000Xf
式中 X,一黄曲霉毒素B标准溶液的浓度,pg/mL;
A一一测得的吸光度值;
M一一黄曲霉毒素B,的分子量,312;
F.,一
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