第四章 抗体制药456节教材编辑.pptVIP

第四节 基因工程抗体和抗体工程 Winter等人建立了噬菌体抗体库，克服了人体不能随意免疫的缺点，用人的外周血制备抗体文库，获得了人源性基因工程抗体。 在此之前，基因工程抗体技术只能对已有的单体进行改造，而抗体库技术的诞生却可以不通过动物免疫和细胞融合便可以从抗体库中筛选得到全新的人源化的抗体，并通过细菌发酵或转基因动植物生产出来。抗体库技术的发展使得抗体工程技术进入了一个全新的时期。 抗体库技术的生产与发展基础在于两项关键技术的突破，一是PCR技术的应用使得人们可以利用一组引物扩增出全套免疫球蛋白的可变区的基因；二是从大肠杆菌中直接表达出有功能活性的抗体分子片段。基因原理是将某种动物的所有抗体可变区的基因克隆在质粒或噬菌体载体中进行表达，分泌，然后通过特定的固相化抗原便可筛选出高度特异性抗体基因的克隆。该抗体库又称全套抗体库或组合抗体库。 用基因工程的方法可以将抗体基因的克隆和表达融为一体，同在一种载体上进行，将抗体基因表达在载体的表面，用固相化抗原对表达产物的载体进行淘筛，在数日内就可筛选出阳性克隆。 一、噬菌体抗体库技术的基本方法 ⒈ 获取目的基因（RT-PCR） ⒉ 抗体库技术的载体（噬菌粒phagemid为载体） 具有噬菌体与质粒特点、转化效率高、库容量大 ⒊ 淘筛抗原固相化后，对噬菌粒群的吸附、洗涤和洗脱后再感染扩增。 ⒋ 表达与鉴定 （Western bl