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第8章基因工程 基因工程 1、基因工程？ 在宿主细胞中克隆特定的基因并使其表达，以获得基因表达的产物，也可定向改造细胞或生物个体。 2、基因克隆？ 又叫分子克隆。即将特定的DNA片段通过载体导入宿主细胞，在受体细胞中复制、扩增，以获得单一DNA分子的大量拷贝。 2、基因工程的意义 1) 获得大量的有应用价值的酶：纤维素酶 2）得到有药用价值的生物制品：尿激酶 3）改造工业用微生物 4）可对一些疾病进行基因治疗 3、基因工程的基本环节 1）目的基因的获得 2）目的基因克隆 3）导入宿主细胞 4）表达 原核基因工程各环节浅析 1、目的基因的获得 1）提取基因组DNA，经PCR扩增获得 2）提取总RNA，经RT-PCR获得 3）化学合成 4）从基因组文库或cDNA文库中调取 2、DNA重组 1）DNA分子重组技术 在体外把特定的DNA片段插入核酸载体中并形成磷酸二酯键连接，从而组合成一个新的DNA分子。 2）载体：基因的渡船 一个可结合特定DNA片段并把它转运进细胞中的物质。常用的载体有质粒，噬菌体和病毒等。 载体的特点 ①能在宿主细胞中复制繁殖，复制能力越高越好。 ②容易进入宿主细胞，效率越高越好。 ③容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。 ④容易从宿主细胞中分离纯化出来　　 ⑤有容易被识