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- 2019-07-26 发布于江苏
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5L发酵罐发酵L-乳酸(综合性试验)
实验指导书
5L发酵罐发酵L-乳酸实验涉及微生物学,生物工程原理,有机酸工艺学,发酵工厂设备,工业发酵分析等多门课程内容。希望同学们复习这些相关知识,了解从生产菌种到发酵法制备大宗化工原料的全过程。
实验目的
学习掌握利用发酵法生产L-乳酸的原理和工艺操作。
熟练掌握5L发酵罐的结构和使用方法。
掌握L-乳酸、残糖和菌体浓度的测定方法。
实验原理
乳酸分子式为:CH3CH2OCOOH,分子量90.08,因为乳酸分子内含有一个不对称的C原子,从而具有D-型和L-型两种构型。L-乳酸为右旋,D-乳酸是左旋的,当L(+)-乳酸和D(-)-乳酸等比例混合时,即成为消旋的DL-乳酸。
乳酸生产有三种方法:化学合成法,酶法和微生物发酵法。发酵法制备乳酸是以淀粉、葡萄糖、等糖类或牛乳为原料,接种微生物经发酵而生成乳酸。乳酸发酵机理主要有:Ⅰ.同型乳酸发酵,Ⅱ.异型乳酸发酵,Ⅲ.双歧杆菌发酵。
本实验用菌为嗜热乳酸杆菌(T-1),发酵方式为同型乳酸发酵。发酵机理如下:
葡萄糖经 EMP 途径降解为丙酮酸,丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下还原为乳酸。发酵方式如下:
经过这种途径, 1 mol 葡萄糖可以生成 2 mol 乳酸,理论转化率为 100 %。但由于发酵过程中微生物有其他生理活动存在,实际转化率不可能达到 100 %。一般认为转化率在 80 %以上者,即认为是
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