几种新型呫吨类荧光分子探针的设计、合成及其细胞成像应用研究-生物化工专业论文.docxVIP

M．D．Dissertation M．D．Dissertation lIIIIIII III IIIIII Illl III III Y3045362 The design，Synthesis and Cell imaging applications of Several new fluorescent molecular probes based on xanthene By Qiansheng Cao Supervised by Associate Proj．Xiaofeng Bao Nanj ing University of ScienceTechnology March，2016 万方数据 万方数据 万方数据 声 声 明 本学位论文是我在导师的指导下取得的研究成果，尽我所知，在本学位 论文中，除-r)Jl以标注和致谢的部分外，不包含其他人已经发表或公布过的 研究成果，也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。 与我一同工作的同事对本学位论文做出的贡献均已在论文中作了明确的说 明。 研究生签名：二魄 沙砧年弓月J7日 学位论文使用授权声明 南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可以借阅或上 网公布本学位论文的部分或全部内容，可以向有关部门或机构送交并授权 其保存、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容。对于保密论文，按 保密的有关规定和程序处理。研究生签名：』晔 沙，6年弓月，／7日 万方数据 万方数据 硕士学位论文 硕士学位论文 几种新型咕吨类荧光分子探针的设计、合成及其细胞成像应用研究 摘要 以罗丹明和荧光素为典型代表的咕吨类染料由于其具有十分优越的光物理性质，目 前已经被广泛的应用于环境科学、食品科学、生命科学以及药学等领域。本论文在实验 室原有工作的基础上，设计并合成了三种以罗丹明B和荧光素为母体的荧光分子探针， 本论文主要研究工作如下： 第二章中，我们以罗丹明B和二(吡啶．2．甲基)胺设计合成了一种新型荧光分子探 针RBDPA。在EtOH／HEPES(1：l，v，v，100州，pH 7．2)溶液中，通过紫外可见、荧光 光谱分析以及肉眼可辨的颜色变化能够选择性识别A13+。通过Job’s plot，1H NMR滴定 以及DFT计算等数据发现，RtlDPA与A13+的结合比例为1：l，结合常数Ka=3．84×104 M～，检出限为O．196 laM。RBDPA的人L．02细胞成像及其毒性实验，证明了其在检测 生物活体中A13+的应用价值。 第三章中，我们通过硫代二甘酸将两个罗丹明B分子链接起来合成出一种新型的 “off-on”荧光分子探针，在Metll趾ol／HEPES(3：1，v／v,O．5mM，pH7．25)溶液中，实现了 在紫外可见光谱、荧光光谱中对铬离子的定性检测。经过Job’splot、1HNMR滴定、MS、 DFT计算等实验，确定了RBTDA与C一的结合比例为l：1，RBTDA．Cr3+络合物的结合 常数Ka=5．01 x104 M～，且探针在溶液中对Cr3+的检出限为0．378 gM，人L．02细胞成像 及毒性试验证明RBTDA在生物活体检测方面具有潜在的应用。 第四章中，我们设计并合成了一种荧光素衍生物FIPY，在DMSO／HEPES(3：l，v／v, lmM，pn 7．2)溶液中，通过紫外可见光谱及荧光光谱，能够选择性识别Cu2+。Job’s plot 实验表明探针FIPY与Cu2+的结合比例为l：l，探针FIPY与Cu2+的结合常数为1．29×104 M～，检出限为0．296 laM。 关键词：罗丹明B，荧光分子探针，金属离子，荧光素，人L一02细胞 Abstract 硕士学位论文 Abstract Rhodamine and fluorescein as a typical representative of the xanthene dye because of its very favorable photophysical properties，it has been widely used in environmental science，岛od science，life science ，pharmaceutical and oth