鸡新城疫、鸡传染性支气管炎基因芯片的构建及其检测技术研究-预防兽医学专业论文.docx

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 鸡新城疫(Newcasttle Disease，ND)和鸡传染性支气管炎(Infectious BronchitiS，IB)是鸡的主要呼吸道传染病，严重危害养鸡业的发展。基因芯片技术 是近年来发展起来的一种生物新技术，该技术可应用于基因表达谱分析、基因位点突 变分析和疫病检测等方面。本研究首次构建制备了NDV—IBV基因检测芯片，建立了检 测NDV、IBV基因芯片检测新技术，该技术对NDV、IBV的检测具有同步检测和鉴别诊 断的功能，是动物疫病病原检测方法新的突破和进步。本研究的主要研究内容包括以 下三个方面： 1、NDV-IBV检测基因芯片的靶基因克隆及鉴定研究 对NDV和IBV等病原进行分子生物学特征分析，根据文献和GenBank中报道NDV、 IBV、AIV和IBDV的基因序列，用DNA Club2．0或Arraydesigner 2．0软件设计了5 对NDV靶基因引物、4对IBV靶基因引物、2对AIV和1对IBDV对照靶引物。试验以 NDV Lasota株、NDV F48E9株、IBV M41株、IBV SM株、IBD中等毒力疫苗株和AIV 株为材料，用RNA／DNA抽提试剂盒抽提病毒RNA，反转录合成cDNA。以eDNA为模板， PCR扩增获得了5个NDV靶基因、3个IBV靶基因、2个AIV基因和1个IBDV基因， 分别命名为NDI、