提高细菌耐药性监测质量努力做好细菌耐药性监测(20140330昆明).ppt

建立细菌保存制度 方法 将过夜新鲜培养的细菌置于0.5ml 40％的甘油肉汤管中，于-70℃保存。 意义 抗菌药物药效学评价 耐药机制研究 相关的临床微生物学研究 数据的处理和管理 判断标准：CLSI当年版标准 WHONET软件统计分析 备份文件 定期整理总结本院的监测情况及时发现问题，针对处理。 定期上报上一级耐药监测网 存在的问题？ 不规范的使用药敏试验材料，采用5%脱纤维羊血平皿进行药敏试验 药敏平皿制备不规范，为方便徒手随意浇制药敏平皿 培养时间和培养环境不规范，未按CLSI规定执行 抗菌药物没有按CLSI的要求选择 一些明显违反常规的药敏结果以及罕见的药敏现象需要重新鉴定细菌和进行药敏试验，并送参考实验室进一步验证的意识还需增强 WHONET的数据资料不完整，这不利于进行流行病学的分析和追踪 存在的问题？ 没有使用统一的WHONET统计软件，或随意改动抗菌药物的缩写符号和增加统计项目给统计工作带来不必要的麻烦。 资料管理不规范，没有专人负责输入和保管； 不及时总结资料和定期反馈给临床医师参考。 存在的问题？ 使用自动化仪器进行细菌耐药性监测 优点： 不能应用K-B法的药物都能使用，有MIC结果。 方便省事，结果自动读取 数据导出方便 节省人力物力 质控方便 缺点： 折点更新慢，跟不上CLSI更新速度。 有些药物MIC范围较窄，仅1个或2个稀释度。 应对措施： 补充部分药物K-B法结果 存在的问题？ 建议一、加强呼吸道致病菌的检测及耐药性监测 呼吸道病原菌检出率低：肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌。 近年来耐青霉素肺炎链球菌(PISP+PRSP)在儿童中的检出率逐年上升。青霉素高度耐药菌株系多重耐药株，且出现对第三代头孢菌素耐药菌株；对红霉素的耐药率已达95.1%。 近年来，流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的β内酰胺酶的检出率分别为21.7% 和91.2%（产TEM-1和ROB）型。这些菌株对氨苄西林100 %耐药，有部分菌株对头孢呋辛、头孢噻肟耐药。 建议二、加强VISA、VRSA 监测 各临床微生物实验室应严格按照CLSI标准，密切注意并追踪万古霉素MIC≥ 4μg／mL的金黄色葡萄球菌，加强对VISA和VRSA的检测。 遇到该类耐药菌株时必须按CLSI的规定进行鉴定和稀释法药敏试验．以确认是否为VRSA 和VRE菌株。 VISA和VRSA的检测 方法 VISA VRSA 纸片扩散法 无法检测 抑菌圈内可能有散在菌落 CLSI肉汤微量稀释法 可以检测 可以检测 E-test(0.5麦氏浊度，24小时培养) 可以检测 可以检测 自动化系统 重复性差 重复性差 可以使用含万古霉素的BHI琼脂筛选 建议三、 重视对VRE菌株和HLAR菌株的检测 1988年英国首次报道耐万古霉素粪肠球菌和屎肠球菌，目前在在欧美国家有明显上升趋势 美国VRE感染所占的比例由1989年的0.4%上升到1993年的7.9%，1995年超过10% 28个国家700个临床微生物实验室参加的欧洲1999-2002年的EARSS监测资料报道粪肠球菌的万古霉素耐药菌株为7%，而屎肠球菌为37% 国内已有该类耐药菌株的报道，但各地区报道该类耐药菌株的检出率不一。 但2010年CHINET细菌耐药性监测显示约有3.6%的屎肠球菌和0.6%的粪肠球菌为VRE菌株，基因型为vanＡ和van B 亦有些地区报道为1%-10%，值得引起警惕。 肠球菌属 纸片扩散法筛选 HLAR 2006年CLSI增加了高水平氨基糖苷类耐药性(HLAR)纸片扩散法解释标准 (同MIC 试验一样) 敏感– 可与作用于细胞壁的抗生素协同 耐药 – 将不能与作用于细胞壁的抗生素协同 中介 – 用琼脂稀释法和肉汤微量稀释法进一步测定MIC 年份 屎肠球菌 粪肠球菌 2009 69.4% 40.1% 2010 66.0% 44.0% 2011 67.3% 42.9% 2012 57.9% 33.6% CHINET监测网 肠球菌对庆大霉素耐药率 建议四、加强肠杆菌科细菌中产ESBL、Amp C及KPC酶菌株的监测 是细菌对广谱β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因。 2011年CLSI取消了ESBL的常规检测。 已有报道发现由于AmpC调节基因等突变可导致AmpC 酶 持 续 大量表达（俗称“去阻遏”）；产ESBLs+Amp C 复合酶（52.1%） KPC以及NDM-1的流行。 质粒介导和整合子的参与。 建议五、加强不动杆菌属、铜绿假单胞菌等细菌中的泛耐药株(PDRA)监测 定义：对碳青霉烯类、第三、第四代头孢菌素、单环类、 β-内酰胺酶抑制剂复方制剂、半合成青霉素类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等抗菌药物耐药(多黏菌素除外)。 由泛耐药株引