脂环酸芽孢杆菌(-Alicyclobacillus).ppt

脂环酸芽孢杆菌( Alicyclobacillus)的检测与控制 严纪文 Jiwen.y@163.com 概述 脂环酸芽胞杆菌(Alicyclobacillus)是脂环酸芽胞杆菌属，革兰阳性(仅有一株为革兰阴性)的芽胞杆菌。 人们根据其耐热、耐酸的特性，俗称为耐热菌、耐热耐酸菌、嗜热耐酸菌、嗜酸耐热菌等。 已有文献报导：脂环酸芽胞杆菌是引起果汁、酸性饮料(尤其是巴氏灭菌的果汁)腐败变质的主要元凶。 1998 年美国国家食品生产者联盟(NFPA)经过调查发现，美国35% 的果汁腐败都与嗜酸的芽胞杆菌有关。 嗜酸耐热菌的在芽孢可橙汁中萌发、生长，也可以在30℃的苹果汁、葡萄汁中生长良好。 导致果汁产品腐败的嗜酸耐热菌主要是酸土脂环酸杆菌。引起的果汁腐败变质的主要是它的代谢产物。 2000年起，美国及欧洲大部分果汁消费国要求浓缩果汁中脂环酸芽胞杆菌的含量应<1CFU/10mL。 2002年起，浓缩果汁中对耐热嗜酸菌的要求为不得检出。 脂环酸芽胞杆菌引起腐败的初期不易发现，产品并不出现明显的涨包或酸败。 因而在低污染时难以检出，但其代谢产物达到万亿分之一的浓度时，就会使果汁口感风味变劣、浊度升高乃至在包装底部形成白色的沉淀等质量危害。 其芽胞还可污染生产中的半成品(浓缩果汁)、生产材料(加工水果)、生产设备。 Walls 等人对酸土环脂芽孢杆菌的致病性进行了研究，他们将含有高浓度酸土脂环酸芽孢杆菌的生理盐水悬菌液0.5ml 注射到小鼠腹膜内，小鼠未表现出任何异常现象，证明在受试浓度内该菌不具致病性。用含菌5×106CFU/ m l 的苹果汁饲喂豚鼠，一周后豚鼠仍表现正常。至今未见关于饮用了含脂环酸芽孢杆菌的果汁后导致疾病的病例报道。 小结：脂环酸芽胞杆菌虽然可引起饮料变质，但目前未发现其对人致病。 愈创木酚 愈创木酚，又称邻甲氧基苯酚、2 - 甲氧基苯酚。是用于食品的合成调味料，它可以产生甜、烟熏和烧烤风味。 卤酚 溴酚：包括2，6- 二溴苯酚(2，6- DBP)和2，6- 二氯苯酚(2，6-DCP)，可产生“药味”、“消毒水味”。 脂环酸芽胞杆菌的分类与命名 1971年Darland和Brock在美国的酸热环境中分离到芽孢杆菌Bacillus acidocaldarius ，该菌细胞膜中具有独特的ω-环己烷脂肪酸结构和藿烷化合物结构； 且这种菌只在酸热的环境中存在，将其命名为酸热脂环芽孢杆菌。 不久Hippchen等也在土壤中分离到相似的菌株。 1984年Cerny等在腐败的苹果汁中分离到一株细胞膜中含ω -环己烷脂肪酸结构的芽孢杆菌，高度怀疑该菌导致了苹果汁的腐败。 1987年Deinhard 等对包括前述菌株的13株耐热耐酸菌做了结构分析和全面的鉴定。将其中一株与B. acidocaldarius相似的菌株命名为酸土环脂芽胞杆菌(B.acidoterrestris )。 1992年Wistozkey 等对这些菌株进行了16S rDNA 序列分析将这三株菌从芽孢杆菌属中划分出来，命名为脂环酸芽孢杆菌属( Alicyclobacillus)。 Churey等人1994 年从腐败的苹果汁中发现嗜酸耐热芽胞菌，经鉴定为酸土脂环芽胞杆菌。 Splittstoesser等人从腐败的无菌包橙汁中发现2 株嗜酸耐热芽胞菌，革兰染色阳性，芽孢耐热性D90℃为16~23min，D95℃为 2.4~2.8min。 脂环酸芽胞杆菌的模式株：A.acidoterrestris酸土环脂芽胞杆菌。 1998~2003年，不断有人从南极、亚速尔群岛、日本仙台火山附近的土壤中分离到这类细菌。 至此脂环酸芽胞杆菌属有11个种，1个亚种。该菌属新菌种的发现仍在继续。 脂环酸芽胞杆菌的生化特性 可生存在高温、高酸的条件下。 最适生长温度为42~53℃，生长pH2.0~6.0。 在某些特殊的培养基中不能生长。如：酸土环脂芽胞杆菌不能生长于含胰酪蛋白胨、牛肉汤琼脂的培养基中，甚至pH达到3.5时也无法生长。 菌株在培养基中45℃需氧培养 1~2d即形成明显的菌落。 菌落形态一般为圆形饱满、乳白色、半透明或不透明，直径为0.5～5mm。 菌体形态为杆状，革兰染色阳性，产芽孢，芽孢呈椭圆形，端生或次端生，有时会使菌体细胞膨大，菌体宽0.35~1.1μm、长2~6.3μm。 好气生长。 对脂环酸芽胞杆菌的生化鉴定常采用API 50CHB鉴定系统。 API 50 CHB鉴定系统采用49 种碳源(糖、醇)，观察芽胞杆菌对其的利用情况进行编码鉴定。但脂环酸芽胞杆菌的部分菌株之间糖利用情况的差异并不显著，往往需要进一步的鉴定。 酸土环脂芽胞杆菌生化反应 目前分离脂环酸芽胞杆菌的常用培养基： BAM( Bacteria Acidocaldarius medium