重庆医科大学临床检验诊断学考博试题.docVIP

临床检验诊断学 病例分析（全英文的病例） 去年考的是梗阻性黄疸 名词解释 （1）APTT （2）CTnT CTnI （3）FQ-PCR (4) 增强免疫比浊法 （5）DNA芯片/基因芯片 （6）TrFIA （7）AG（阴离子间隙） 简答题，分析题 （1）脂蛋白与AS的关系？ （2）影响酶促动力学的因素？ （3）肾小管与集合管的功能检测？ （4）实验室生物安全防护？ （5）对一个已知基因序列片段的功能分析（其蛋白质水平上的功能分析），设计你的实验思路 分析化学 名词解释 （1）DNA芯片 采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等等生物样品有序地高密度固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面，制成点阵，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。根据芯片上固定的探针不同，生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片。如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片；如果芯片上固定的分子是寡核苷酸探针或DNA，就是DNA芯片。DNA芯片技术包含四个基本要点：DNA方阵的构建、样品的制备、杂交,杂交图谱的检测及读出。 DNA芯片技术的应用：基因表达分析，基因型和多态性分析，疾病的诊断与治疗，肿瘤检测研究及抗肿瘤药物筛选，临床应用蛋白质芯片(protein array)是近年来蛋白质组学研究中兴起的一种新的方法，它类似于基因芯片，是将蛋白质点到固相物质上，然后与要检测的组织或细胞等进行“杂交”，再通过自动化仪器分析得出结果。这里所指的“杂交”是指蛋白与蛋白之间如(抗体与抗原)在空间构象上能特异性的相互识别。此方法与传统的研究方法相比具有如下优点: ①蛋白质芯片是一种高通量的研究方法，能在一次实验中提供相当大的信息量，使我们能够全面、准确的研究蛋白表达谱，这是传统的蛋白研究方法无法做到的。②蛋白质组芯片的灵敏度高，它可以检测出蛋白样品中微量蛋白的存在，检测水平已达ng 级。③蛋白质芯片具有高度的准确性。 蛋白质芯片的运用：蛋白质组芯片可用于蛋白质组学研究中的各个领域，具体来说大致可分为三个方面: 研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用，筛选新的蛋白质。用于现在其它方法不能检测到的，如蛋白质-药物、蛋白质-脂质之间的相互作用。还可用于检测蛋白与小分子物质的作用，例如蛋白质与DNA ，RNA分子等。 问题：蛋白质芯片的制作是决定其运用的关键因素之一， 蛋白质组芯片的制作比当前流行DNA 芯片制作要复杂， （2）变性高效液相色谱（DHPLC）（Denaturing High Performance Liquid Chromatography，DHPLC） 又称为温度调控的杂合双链色谱（Temperature Modulated HeteroduplexChromatography，TMHC），是一种检测DNA突变的HPLC技术。 DHPLC检测DNA突变主要是在适当的部分变性温度和洗脱条件下，通过离子对反相高效液相色谱技术使不匹配的异源双链DNA与匹配的同源双链DNA得以分离和检测。 已广泛用于基因突变检测、单核苷酸多态性分析（SNPs）和短片段串联重复序列分析（STRs）。 在色谱分离过程中，带正电荷的TEAA离子与带负电荷的DNA缔合为离子对，TEAA/DNA离子对通过TEAA分子中的烷基链在固定相上产生保留。DNA片段越长，所带负电荷越多，与之结合的TEAA分子就越多。因此，DNA片段越长，与固定相的亲和力就越强。所以，在不变性温度条件下，可分离长度不同的纯合双链DNA分子。 （3）化学发光酶免疫分析法（ECLIA） 化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。 化学发光酶免疫分析( chemi luminescent enzyme immunoassay,CLEIA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P)