红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究-园艺学报.PDF

园 艺 学 报 2014 ，41 （10）：2139 –2146 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究 * 涂红艳，肖 望 ，邓崇会 （广东第二师范学院生物系，广州 510303 ） 摘 要：以红姜花（Hedychium coccineum ）的花丝和花药为外植体，通过体细胞胚胎发生途径建立 了植株再生体系。结果表明：外植体在MS + 4 mg · L-1 2,4-D + 4 mg · L-1 NAA + 1 mg · L-1 6-BA + 30 g · L-1 蔗糖 + 7 g · L-1 琼脂的培养基上经过 120 d 诱导出愈伤组织，愈伤组织在 MS + 1 mg · L-1 2,4-D + 0.25 -1 -1 -1 -1 mg · L NAA + 0.25 mg · L 6-BA + 30 g · L 蔗糖 + 7 g · L 琼脂的培养基上经过继代筛选，获得浅黄色 松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在 MS 无机盐 + B5 维生素+ 100 mg · L-1 谷氨酰胺 + 230 mg · L-1 脯氨酸 + 100 mg · L-1 麦芽提取物 + 0.02 mg · L-1 NAA + 0.02 mg · L-1 TDZ + 0.5 ~ 1.0 mg · L-1 2,4-D + 45 -1 g · L 蔗糖的培养基中通过 3 个月的悬浮培养，可得到均质稳定的胚性细胞悬浮系（ECS ）。胚性悬浮细胞 在 SH 无机盐 + B5 维生素 + 100 mg · L-1 谷氨酰胺 + 230 mg · L-1 脯氨酸 + 100 mg · L-1 麦芽提取物 + 0.25 mg · L-1 NAA + 0 ~ 0.20 mg · L-1 TDZ + 45 g · L-1 蔗糖 + 7 g · L-1 琼脂的体胚诱导培养基中培养 10 d，可见 到白色半透明体胚发生，20 d 后体胚发育成熟。当 TDZ 浓度为 0.15 mg · L-1 时，体胚诱导率高达4 500 个 · mL-1 PCV ECS （PCV ：细胞密实体积）。在 SH 无机盐 + B5 维生素 + 0.20 mg · L-1 IAA + 0.25 ~ 1.0 mg · L-1 6-BA + 30 g · L-1 蔗糖 + 7 g · L-1 琼脂的体胚萌发培养基上，体胚萌发率高达 100%。将萌发的体胚 -1 转移到 1/2MS + 1 g · L 活性炭成苗培养基中，进一步发育成正常的再生植株，植株室外栽培成活率达 90% 。 关键词：红姜花；胚性细胞悬浮系；体细胞胚胎发生；植株再生 中图分类号：S 682 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）10-2139-08 Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration of Hedychium coccineum * TU Hong-yan ，XIAO Wang ，and DENG Chong-hui （Department of Biology ，Guangdong University of Education，Guangzhou 510303 ，China