浙科版选修1第一部分《实验一大肠杆菌的培养和分离》ppt课件.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 【例2】仪器和培养基的灭菌。 (1)____________灭菌，属于湿热灭菌法，是最常用的灭菌方法。灭菌程序是：将要灭菌的容器__________，仪器__________________。 (2)物品放入灭菌锅的内胆，放置的原则是________________。加水后放入内胆，加水的要求是_________________。放置好______________后，盖好盖子，拧紧螺丝的顺序是__________________。 (3)水沸后，当压强表到__________kg/cm2时，__________排气阀，让压力表指针回到零。然后__________排气阀继续加温。 【解析】该题考查实验前仪器、培养基灭菌过程中最常用的高压蒸汽灭菌法的操作规范。仪器灭菌后是要取出灭菌锅的，如果不包扎，取时即刻污染。放置物品要整齐、稳定、留出空隙，才可保证蒸汽在锅内流通，达到灭菌效果。水不能漫过物品，否则对于该部位就不是蒸汽灭菌了。一开始排气的目的是为了排出锅内冷空气。 【答案】 (1)高压蒸汽　封口　用牛皮纸包扎　(2)整齐、稳定、留出空隙　水面不触及内胆底　排气软管　逐对上紧对侧的螺丝　(3)0.5　打开　关闭 (1)在细菌的培养分离过程中涉及多个温度指标，请把下列操作过程和它对应的温度指标填在每个灭菌过程后面。 A．121 ℃ B．50～60 ℃ C．35～37 ℃ D．25～28 ℃ E．140 ℃ 用烘干机干热灭菌2～3 h　_____　；恒温培养细菌18～24 h　___　；溶解或灭菌后的培养基倒平板时的温度　____　；高压蒸汽灭菌_____　。 (2)在细菌培养的灭菌环节中，对待不同的设备装置用不同的灭菌方法。请在各对象后面填上灭菌方法。 A．酒精擦拭 B．火焰灼烧 C．高压蒸汽灭菌 D．G6玻璃砂漏斗过滤 手　___　；接种环　_____；含NaHCO3的培养基　____　；制备无菌水 ______ 。 【答案】 (1)E C B 　A (2)A B　 D 　C　 对于这些技术要求，同学们在亲自动手实验的同时，不仅要“知其然”，还需要“知其所以然”。 考点3 菌的接种、分离和培养 1．菌落是由微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见、有一定形态结构的子细胞的群落。由单个菌发展成的菌落即为单菌落。 2．划线分离法：用接种环蘸取菌液或菌落后在培养基上划线的分离方法。划线的新的起点应比前一次的起点菌含量(浓度)低。划线的最终点不能与前面的划线点重叠。不能划破培养基表面。 3．涂布分离法：将稀释的菌液用玻璃刮刀均匀地涂布在培养基上的方法。首先，涂布分离法要先将菌液稀释，而且通常要稀释多个浓度，常稀释到10－5～10－7之间(稀释实验过程见教材P27图)。在涂布时，从不同稀释度的稀释菌液中各取0.1 mL滴在各个固体培养基平板上，再用玻璃刮刀涂布后培养。涂布分离法更易分开单菌落。通常培养皿中有20个以内的单菌落为最合适。其次，通过计数培养基上的菌落数量并结合稀释倍数可测定菌液中的菌的密度。 4．在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。 【解析】 (1)菌落是由微生物在适宜__________培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见、有一定形态结构的子细胞的群体。适宜的培养基，除了含微生物所需的营养物质以外，还要考虑__________、__________等。 (2)______________、______________这两种分离方法都能使培养基的表面形成由__________形成的单菌落，其中________________还可用于对菌液中的菌进行计数。该方法移液量(移动到培养基表面培养计数的液体量)一般为____________________，移液前要对菌液进行__________。 【解析】微生物在液体培养基中能较快繁殖，但不能形成子细胞的集群。当固体培养基表面接种的菌密度足够低时，菌落就是从单个菌体分裂形成的。稀释涂布移液如果为了计数，则要混匀菌液，否则吸液较深，测量值较真实值偏大，吸液较浅，则测量值偏小。 【答案】 (1)固体　酸碱度　渗透压　(2)划线分离法　稀释涂布分离法　单个菌　稀释涂布分离法　0.1～0.2 mL　振荡 【变式训练3】下列不属于菌落特征的是( ) A．菌落的形状