微生物的实验室培养教学.pptx

微生物的实验室培养;一、培养基： 1.概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基;;（3）按功能分类： 1.选择培养基：根据某种微生物的特殊营养需求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基 2.鉴别培养基：在培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌落与其他外形相似的它种菌落相区分的培养基。主要应用与鉴别菌种（如：伊红—美蓝培养基） ;4、配置天然培养基用的几种原材料特性： 牛肉膏：瘦牛肉加热抽提并浓缩成的膏状物。 价值：富含糖类，有机含氮类，水溶性维生素和无机盐等。 蛋白胨：由酪素或明胶等蛋白质经酸或酶水解而成。 价值：富含有机氮，其中可能还有多种维生素和氮源。 琼脂：从某些海藻中加热提取的复杂糖类。 价值：配置固体培养基时常用作凝固剂，无营养价值 ;二、无菌技术： （一）、区别消毒和灭菌： 1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） 常用方法： （1）.煮沸消毒法：100摄氏度煮沸5—6分钟可杀死微生物营养细胞及部分芽孢 （2）.巴氐消毒法：70—75摄氏度煮30分钟或80摄氏度煮15分钟 （主要应用于不耐高温的液体如：牛奶、啤 酒、果汁、酱油等） （3）.化学药剂消毒：（如酒精擦拭双手、喷洒石炭酸等） （4）.紫外线消毒;2、灭菌：使用强烈理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 常用方法： 1.灼烧灭菌：将各种金属用具直接在酒精灯火焰的 充分燃烧层灼烧 应用：（1）接种环、接种针等金属用具 （2）试管口或瓶口等容易被污染的部位 2.干热灭菌：干热灭菌箱，在160—170摄氏度加热、1—2小时 应用：玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具 3.高压蒸汽灭菌：高压灭菌锅 注：（1）使用时要待冷空气排尽，再密封 （2）灭菌时压力为100KPa，温度121摄氏度 应用：培养基灭菌;2. 在微生物培养时获得纯净培养物的关键 防止外来杂菌入侵， 无菌技术主要围绕如何避免杂菌的污染展开，包括以下内容： （1）对实验操作的空间，操作者的衣着和手进行清洁和消毒 （2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 （3）实验操作应在酒精灯火焰附近进行 （4）操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触 注：实验后，所有用过的培养基，培养液等都要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则会造成环境污染 ;三、关于无菌操作： （一）平板培养基制备的一般步骤： 1.计算 2.称量： 注：牛肉膏较粘稠，可以用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量 3.溶化： 注：（1）将牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加少量的水，加热待牛肉膏与称量纸分离后，取出称量纸 （2）熔化琼脂时要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂;4.灭菌： 注：（1）制作的棉塞要求即能防止杂菌感染又要通气良好，棉塞的松紧以不留缝隙为标准 ;（2）倒平板时锥形瓶口要通过火焰。 ;(二) 接种方法: 微生物的接种方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布法，另外还有斜面接种和穿刺接种等，各种方法虽然各有不同，但其核心均是防止杂菌污