小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒使用说明书.pdf

广东环凯微生物科技有限公司研制 小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速检测试剂盒使用说明书 （使用前请详细阅读本说明书） 【产品名称】 显色指示剂 80 μL×1 管 通用名称：小肠结肠耶尔森氏菌核酸快速 超纯水 1 mL×1 管 检测试剂盒 说明书 1 份 英文名称：Rapid Detection kit forYersinia 【储存条件与保质期】 enterocolitica 2~8℃条件下储存，有效期为 12 个月 【包装规格】24 测试/盒 【适用仪器】 【产品编号】KJD11L 1. PCR 仪器或金属浴恒温器，如果检测样品 【产品简介】 为DNA 样品，水浴锅即可。 本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术 2. 高速离心机，样品的前处理需要用高速离 （Loop-mediated isothermal amplification ， 心机做分离。 LAMP ），用于食品中小肠结肠耶尔森氏菌的 【样品富集】 快速检测，可借助显色指示剂直接判读结果。 1. 样品前处理：取25g 待检样品置于225 mL 【检测原理】 改良磷酸盐缓冲液（PSB ）中，前增菌 利用两对特殊引物和具有链置换活性的 10-12 h，对增菌液中的菌体富集用于 Bst DNA 聚合酶，使模板两端引物结合处循环 LAMP 快速检测。 出现环状单链结构，引物顺利与模板结合并进 2. 适用样品类型：增菌液或者可疑菌落样品。 行链置换扩增反应，实现在恒温条件下 3. 待测样品存放：粗提的待检DNA 样品保 （60-65℃）进行连续快速扩增。反应加入显 存于-4~0℃，不应该超过24 h ；利用试剂 色指示剂，阴阳性结果显色差异显著，可直接 盒提取的DNA 样品可在-20℃长期保存， 通过颜色变化判读结果。 但应避免反复冻融。 【产品特点】 【使用指南】 1. 快速简便：将酶、引物等反应组分混匀后 1. 样品前处理 进行干粉化处理，增加试剂稳定性，使用 A. 样品增菌液模板DNA 的制备： 时减少溶液配制步骤，更为便捷，整个检 a) 吸增菌液1 mL 到1.5 mL规格的无菌离心 测反应可在1 h 内完成； 管中，6000 r/min 离心5 min，弃上清； 2. 特异性高：利用靶基因序列上的多个独立 b) 加入30 μL 裂解液，充分悬浮菌体，轻弹 区域设计多条引物，保证扩增反应的高度 管壁消除气泡，99℃加热10 min。 特异性； c) 12000 r/min 离心15 min，上清即为粗提 3. 灵敏度高：最低检验限达到 18 CFU/Test ； 的DNA ，可转移至0.2 mL 无菌离心管中， 4. 判读简单：反应前加入显色指示剂，反应 在-20℃下可长期保存。 后通