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天门冬氨酸氨基转移酶测定(AST)- IFCC法
?用途:
?
??用于自动生化分析仪测定血清或血浆中AST活力。AST是常用的肝功能试验和心肌梗塞酶学?指标。
方法学原理:
?
?L-天门冬氨酸+a-酮戊二酸????????AST?????草酰乙酸+L-谷氨酸??草酰乙酸+NADH+H+??????? MDH? ???L-苹果酸+NAD+?试剂成分以及浓度:
?
? R1
?成?? 份?
?浓?? 度
?成?? 份
?浓? 度
?
?NADH
?0.18mmol/L
?LDH
?≥0.8KU/L?
?MDH
?≥0.6KU/L
?-
?-
??R2
?L-门冬氨酸
?200mmol/L
α-酮戊二酸
?12mmol/L?
?使用方法:
?
?1.?仪器要求:适用于各类自动生化分析仪或半自动生化分析仪。?2.?标本要求:样品为空腹新鲜血清、EDTA或肝素抗凝血浆,溶血会产生干扰。?3.?稳定性与保存:试剂在2~8℃避光保存可稳定一年。单试剂工作液2~8
?
?主波长
?340nm
?标本
?5μl
?反应方法
?速率法
?延滞时间?
?90秒
?辅助波长
?410nm
?R1
?200μl
?反应方法
?向? 下
?读数时间
?150秒?
?反应温度
??37
?R2
?100μl
?计算因子?
3376(340nm/410nm,1cm光径)?4118(340nm/380nm,1cm光径)?
?5.?测定方法:????????
?
?加? 入? 物
?空 白 管(B)
测 定 管(T)?
?R1
?200μl
?200μl
?蒸? 馏? 水
?15μl
?-
?标???????? 本
?-
?15μl
?混合,置37℃
?R2
?100μl
?100μl
?混合,置37℃
??????? 单试剂操作:工作液配制:临用时将R1与R2按2:1混合
?
?加? 入? 物
?空? 白? 管(B)
?测? 定? 管(T)
?工? 作? 液
?300μl
?300μl
?蒸? 馏? 水
?15μl
? -
?标?????? 本
?-
?15μl
??混合,置37℃
?6.?结果计算:???? AST活性(U/L)=(D A测定/min-D A空白/min)×3376(340nm/410nm,1cm光径)???? AST活性(U/L)=(D A测定/min-D A空白/min)×4118(340nm/380nm,1cm光径)?7.?正常参考值:???? 男11~49U/L??? 女11~40U/L?? (37℃
?注意事项:
?
?1.?如果试剂变混浊或试剂空白吸光度值(340nm)小于1.0,试剂已失效。?2.?如果标本中AST活力>700U/L(30℃)或>1000U/L(37
?性能特征:
?
?1.?线性范围:700U/L(30℃);1000U/L(37℃)?2.?准 确 度:r=0.996?? 线性回归方程y=1.01x+0.52(与相同方法商
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