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免疫组织化学技术的原理及方法;免疫组织化学技术的原理及其方法;一、免疫组化技术的基本知识;一、 免疫组化技术的基本知识;免疫球蛋白的化学结构及其模式图;免疫球蛋白的化学结构及其模式图;多克隆抗体与单克隆抗体及其产生;多克隆抗体与单克隆抗体及其产生;多克隆抗体与单克隆抗体及其产生;免疫小鼠Mouse;;;;标记抗体;酶 — 抗酶抗体复合物;亲和素—生物素复合物( Avidin-Biotin Complex ABC ); 酶标亲和素(Labelled streptavidin);多聚物载体;;;;二、免疫过氧化物酶染色技术的基本原理;免疫过氧化酶染色技术的基本原理;识别系统;显示系统;显示系统;免疫过氧化酶染色的多种方法中,其主要的不同点在于显色系统的差异:
间接酶标法:利用标记于桥联抗体的酶
PAP法: 利用PAP复合物
ABC法: 利用AB复合物
LSAB法: 利用直接标记于亲和素的酶
EPOS一步法及EnVision二步法:多聚物载体
;联结系统;三、免疫组化染色方法的类别;免疫组化染色方法的类别;直接法;;间接法;;PAP法(Peroxidase-AntiPeroxidase,过氧化酶-抗过氧化酶法);PAP法(Peroxidase-AntiPeroxidase,过氧化酶-抗过氧化酶法);PAP;ABC法(Avidin-Biotin Complex,亲和素-生物素法);亲和素—生物素复合物( Avidin-Biotin Complex ABC );ABC法(Avidin-Biotin Complex,亲和素-生物素法);;ABC与PAP 法的比较;LSAB(SP)法(labelled streptavidin biotin method)标记的链霉亲和素-生物素法; 酶标亲和素(Labelled streptavidin);SP;ABC与LSAB(SP)法的比较;一步法(EPOS)及两步法(Envision);多聚物载体;;;;;;四、免疫组化染色结果的判断及异常着色的原因分析及其对策;特异性着色具备特点
特定的组织
特定的定位 特定的细胞
特定的细胞内的部位
分布上的不均一
着色的不均一性
着色强度的不均一
颗粒性显色:DAB显色剂应为棕黄到棕褐色;CK染色,结肠腺癌细胞膜特异性着色;Kappa 胞浆着色;TdT染色,胞核着色;PR 胞核着色;ER 胞核着色;免疫组化染色结果的判断;异常着色(假阳性)原因及对策;内源酶及内源生物素;抗体自身原因;异常着色原因及对策;异常着色原因及对策;电荷吸附;假阴性的原因分析及对策;无信号片;Mart-1染色;假阴性的原因分析及对策;操作不当
掉片
消化了不该消化的靶抗原
切片放置不平抗体流失
遗漏重要操作步骤(如漏加HRP的底物)
显色时间过短
;谢谢!;;PPT模板下载:/moban/ 行业PPT模板:/hangye/
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