4-1法医毒物分析常用仪器分析.pptVIP

9月14日2005年 吸收系数(absorptivity) 吸收定律中的比例常数a称“吸收系数”,又称“吸光系数”或“消光系数” 其意义是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸收度 在一定的条件下(如单色光波长、溶剂、厚度等)下，吸收系数是物质的特性常数。 9月14日2005年 不同化合物对同一波长的单色光，可有不同的吸收系数；一种化合物对不同波长的单色光可有不同的吸收系数，因此而形成曲线。吸收系数和吸收曲线的不同是定性鉴别的依据。 9月14日2005年 在Beer定律中，吸收系数是吸收度与浓度直线关系中的斜率，是定量参数。其值越大，直线越陡，检测灵敏度就越高。 A = abc 吸收系数有百分吸收系数(E1%1cm)和摩尔吸收系数(ε)两种，前者常用于含量测定，后者多用于分子结构研究。 9月14日2005年 吸收度的加和性 Beer-Lambert一般指溶液中只有一种吸光物质 如果有两种以上吸光物质时，只要物质间不发生化学反应，互不影响性质，吸收定律仍可适用。但此时测得的吸收度为所有物质吸收度的总和，即 A = A1 + A2 + A3 +…… = a1c1 + a2c2 + a3c3 + …… 9月14日2005年 测得的吸收曲线是各种吸光物质的吸收曲线叠加的。 吸收度的加和性是测定混合组分的依据。 从另一角度讲，也给未知物的定性分析以及复杂组成检材的含量测定带来很大的麻烦。 9月14日2005年 影响测定的因素 A .化学因素 * 浓度 只适用于一定浓度范围的情况，溶液浓度太低或太高时，解离、缔合等可使一些物质的浓度和吸光性质发生变化，浓度与吸收度之间的关系偏离Beer定律。 * 酸碱性 具有电解质性质的化合物，在不同pH溶液中所存在的化学状态不同，吸光性质也常不同。有些药毒物具有弱电解质的性质，溶液pH的变化常可改变其吸收光谱的形状和吸收峰位。 * 溶剂 有些化合物可与某些溶剂化合，因此而改变其吸光性质。 9月14日2005年 B. 单色光纯度 吸收定律只有在照射光为单色光的条件下才成立，单色光越纯，吸收定律越准。 * 谱带宽(bandwidth) 谱带过宽一方面使测得值不准，另一方面使尖峰变坦。 * 杂散光(stray light) 多因光学元件污染或霉蚀产生的距测定波长较远的光。杂散光多或很强时，也可使光谱变形。在短波区常使光谱出现假峰。溶剂吸收强时，杂散光的影响犹为明显。 影响测定的因素 9月14日2005年 C. 反射与散射 * 测定光路中，由于溶液及容器的截面反射和溶液中质点对光的散射作用，可使光强减弱。溶液中质点的分子越大或照射光的波长越短，散射就越强。一般情况下，反射和散射可用空白抵偿，有时也会因不能抵偿而引入误差。 影响测定的因素 9月14日2005年 仪 器 紫外可见分光光度计是用于测定紫外光谱和进行光度法测定的专门仪器。不同厂家部分组成不同型号的仪器，虽光路和结构有所不同，但基本都由以下几。 9月14日2005年 9月14日2005年 Design of DAD Extended wavelength range Automated wavelength verification Fast optimization of sensitivity and resolution Excellent wavelength resolution Tungsten lamp Deuterium lamp Holmium oxide filter Cell Programmable slit Grating 1024 element diode array 190 nm 950 nm Lens 感谢安捷伦公司提供此图片 9月14日2005年 应用意义 A．应用的广泛性 * 优点 测定时不破坏样品。 绝大部分药毒物具有紫外吸收。 样品溶液浓度与吸收度间有良好的计量关系。 有较高的灵敏度， * 应用定性分析中广泛用于预试、筛选和鉴别。 常用于定量。 9月14日2005年 B、应用的局限性 * 缺点 光谱特征信息量少 不具备分离能力 * 应用宽谱带光谱，光谱特征局限性，定性能力较弱。 杂质干扰大，成分复杂的检材应用受限。 常用仪器分析 9月14日2005年 常用仪器分析(1) 9月14日2005年 第一节 光谱分析法 一、紫外-可见分光光度法 （一） 光吸收定律 （二） 紫外-可见吸收光