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DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II
DIG High Prime DNA 标记及杂交检测试剂盒II
说明书版本：Version12 （2009 年11 月）
利用随机引物法及DIG-dUTP （碱不稳定）进行DNA 标记反应，采用酶联免疫方法及即用型
化学发光底物CSPD 进行杂交分子的显色。
2
本试剂盒可对 10ng-3μg DNA 进行 12 次标记反应，可进行24 次杂交检测反应（100cm 杂
交膜）。
产品目录号：11 585 614 910
试剂盒于-15 ~ -25℃保存
1
1. 概况
1.1 说明书内容
1. 概况……………………………………………………………………………………… 2
1.1 说明书内容…………………………………………………………………………………2
1.2 试剂盒组成…………………………………………………………………………………3
2. 介绍……………………………………………………………………………………… 4
2.1 产品概述…………………………………………………………………………………4
3. 实验步骤和需要的材料…………………………………………………………………7
3.1 实验开始前准备…………………………………………………………………………7
3.2 实验流程…………………………………………………………………………………7
3.3 DIG-DNA 标记……………………………………………………………………………7
3.4 定量标记反应效率………………………………………………………………………10
3.5 DNA 转膜和固定…………………………………………………………………………12
3.6 杂交……………………………………………………………………………………… 13
3.7 免疫检测…………………………………………………………………………………14
3.8 探针洗脱和重探…………………………………………………………………………15
4 附录……………………………………………………………………………………… 17
4.1 疑难问题解决……………………………………………………………………………17
4.2 参考文献…………………………………………………………………………………18
2
1.2 试剂盒组成
管/瓶号 标签 成分及功能
1 DIG-High Prime •50μl，用于DNA 的随机引物法高效标记，即用
•5×标记反应液，含浓度优化的随机引物、核苷酸、
DIG-dUTP （碱不稳定）、Klenow 酶及缓冲液。
•澄清的粘性溶液
2 DIG-labeled Control DNA •20μl，用于确定反应标记效率
•pBR328DNA (5μg/ml ,BamHI 线性化处理)
•澄清溶液
3 DNA Dilution Buffer •3×1ml
•10mM Tris-HCl, 1mM EDTA（含50μg/ml 鱼精DNA，
pH8.0, 25℃)
•澄清溶液
4 Anti-Digoxigenin-AP •50μl
Conjugate •750U/ml，Fab 片段，羊源，结合了碱性磷酸酶
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