分子发光分析.PDF

第12 章 分子发光分析 第十二章 分子发光分析 教学要求 1．掌握分子荧光、磷光和化学发光的产生机理；掌握激发光谱和发射光谱特征。 2．掌握荧光与分子结构的关系以及溶液的荧光（磷光）强度影响因素。 3．了解荧光（磷光）分析法的特点及定量测定方法。 4．了解荧光、磷光和化学发光分析仪器的结构。 重点：荧光和磷光分析基本原理 难点：荧光和磷光分析基本原理 课时安排：2 学时 §12-1 分子发光分析概述 基态分子吸收一定的能量，跃迁到激发态，激发态分子以辐射的形式释放 能量返回基态，便产生了分子发光。发光分析(luminescence)主要包括分子荧光 （Molecular Fluorescence ）、磷光（Molecular Phosphorescence ）和化学发光 （Chemiluminescence ）分析法。 §12-2 荧光和磷光分析基本原理 1、荧光和磷光的产生 处于分子基态单重态中的一个电子被激发时，通常跃迁至第一激发态单重 态，也可能跃迁至能级更高的单重态上。这种跃迁是符合光谱选律的，如果跃迁 至第一激发三重态轨道上，则属于禁阻跃迁。 荧光：处于第一激发单重态中的电子跃回至基态各振动能级发出的光辐射。 磷光：处于第一激发三重态中的电子跃回至基态各振动能级发出的光辐射。 单重态与三重态的区别在于电子自旋方向不同，激发三重态具有较低能级。 在单重激发态中，两个电子平行自旋，单重态分子具有抗磁性，其激发态的 -8 -4 平均寿命大约为 10 s，而三重态分子具有顺磁性，其激发态的平均寿命为10 ~ 1s 以上 （通常用S 和T 分别表示单重态和三重态）。 处于激发态的电子，通常以辐射跃迁方式或无辐射跃迁方式再回到基态。辐 射跃迁形式主要为荧光或磷光；无辐射跃迁是指以热的形式辐射其多余的能量， 包括振动弛豫（VR ）、内转换 （ic ）、系间窜跃（isc ）及外部转换 （EC ）等。 （1）振动弛豫 激发单重态的电子在同一电子能级中会由高振动能级转至低振动能级，而 将多余的能量以热的形式发出，产生振动弛豫。 12-1 第12 章 分子发光分析 （2 ）内转换 当两个电子能级非常靠近以至其振动能级有重叠时，常发生电子由高能级以 无辐射跃迁方式转移至低能级。产生内转换。 电子通过内转移及振动弛豫，均跃回到第一激发单重态的最低振动能级。 （3 ）系间窜跃 不同多重态间 （如单重态和三重态）的无辐射跃迁，叫系间窜跃。例如 S1 →T 。当发生系间窜跃时，电子由S 的较低振动能级转移至T 的较高振动能级。 1 1 1 （4 ）外转换 溶剂中的激发分子与溶剂分子或其它溶质分子之间互相碰撞而失去能量，并 以热能的形式释放出来。 （5 ）荧光发射 处于第一激发单重态中的电子跃回至基态各振动能级时，将产生荧光（λ3 ）。 很明显，λ 的波长较激发波长λ 或λ 都长，而且不论电子开始被激发至什么 3 1 2 -7 -9 高能级，最终将只发射出波长λ 为的荧光。荧光的产生在10 -10 s 内完成。 3 第一激发态