凝胶渗透色谱仪WATERS1515.DOC

凝胶渗透色谱仪Waters GPC操作规程 仪器名称：凝胶渗透色谱仪 仪器型号：Waters GPC 生产厂家：美国Waters公司 操作步骤 1. 开机 1.1 接通外电源 1.2 依次打开泵、柱温箱、检测器开关 1.3 打开计算机电源 1.4打开主软件 2. 参数设置 2.1 链接运行模块 2.2 设置流速、温度 2.3 加入无水流动相 2.4 运行5-10分钟参比 2.5 结束参比循环 2.6 运行基线直到基线稳定 3. 运行方法 3.1解掉循环采集样品 3.2 运行结束分析数据 3.3 保存数据 4. 拷贝数据 4.1使用软盘拷贝数据 5. 关机 5.1 关闭软件、电脑 5.2 关闭检测器、柱温箱、泵 5.3关闭电源 5.4 清洁仪器，打扫实验室 6 注意事项 6.1 实验过程中注意压力变化情况 6.2 注意不溶流动相和酸碱及强极性及含盐物质不能进样 6.3 注意信号强度不要超标 Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱（GPC）操作规程 一、溶剂和样品准备 1. 选择溶剂： 尝试和选择对聚合物具有良好溶解性的 THF 或者 DMF 作为 溶剂； 2. 溶剂处理：采用溶剂过滤系统（真空抽滤）对色谱纯溶剂进行过滤和脱 气处理； 3. 样品配制：选用处理后的溶剂配置待测样品溶液，样品体积≥4mL；样 品浓度根据估算的分子量确定 （Mw＝103～104， 浓度为 1.5～2mg/mL； Mw＝104～ 105，浓度为 1～1.5mg/mL；Mw＝105～5 x 105，浓度为 0.5～1mg/mL；Mw＝5 x 105～106，浓度为 0.1～0.5mg/mL；Mw＞106，浓度为 0.05～0.1mg/mL）； 4. 样品溶解： 提供足够时间使聚合物完全溶解 （一般在室温下静止过夜） ； 注：可轻微摇动样品以促进溶解但不 \o Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱(GPC)操作规程_文档下载 Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱(GPC)操作规程_文档下载 可剧烈摇动； 5. 样品过滤：样品溶解后，采用一次性微孔滤膜（孔径 0.22μm）对样品溶 液进行过滤，保存滤液待用； 注意： 每个样品需要准备两个样品瓶 （分别用于溶解样品和放置过滤后的溶液） 和两个注射器（分别用于过滤和进样） 二、仪器启动 1. 将经过真空抽滤的溶剂倒入溶剂存贮瓶中； 2. 依次打开稳压电源－计算机－泵－柱温箱－示差折光检测器开关； 3. 启动 Breeze 软件，输入用户名 Breeze；选择 1515-2414 系统，确定； 4. 在 Breeze 软件系统中点击运行样品－点击 流量图标设置泵流速 0.2mL/min，注意：设置变化时间为 2min，即以 0.1mL/min 缓慢增加流速，使色 谱柱所受压力缓慢变化； 5. 在示差折光检测器面板上，点击 Temp o C 设置温度 40 o C（set/control）；再点击 Home－Shift 1－显示 Purge 图标； 此时示差检测器为 Purge 流路， 冲洗示 差检测器的样品池及参比池；点击平衡系统/监视基线图标－调用 PS-purge 方法 －点击平衡/监视器，监控基线；Purge 时间为 10h； 6. 10h 后（此时基线已稳定），在运行样品界面点击 设置泵流速 1mL/min（设置变化时间 8min，以 0.1mL/min 缓慢增加流速），平衡 0.5h； 7. 在示差折光检测器面板上，点击 Shift 1，取消 Purge（回到正常测样流 路），平衡 3～5min；再依次点击 Diag－Optimize LED(16~17 正常) －Enter－ Home； 三、样品测试 1. 点击 Breeze 软件系统中的单进样图标－输入待测样品名－选择功能 （宽 分布进样）－选择方法组 PS－输入进样体积（20μL）及样品测试时间（45min） －点击单进样，准备进样；此时窗口显示等待进样； 2. 选用 1mL 注射器，安装色谱专用平头针头，采用过滤后样品溶液润洗 进样注射器后，再抽取过滤后的样品溶液；将针口朝上排出气泡（注意针头不要 有液珠，否则会污染进样口，必要时用镜头纸擦拭）；将进样阀门拨到 Inject 位 置（即垂直状态），将进样注射器插入进样器内并插到底（不用过于用劲），进 样；进样结束后迅速将进样阀门拨到 Load 位置； 此时窗口显示进样正在运行； 注意：进样结束后，使用抽滤后的溶剂及时清洗针头； 3. 到设定的运行时间后，仪器自动停止数据采集，此时窗口显示单进样结 束；20min 后，按步骤 1 和 2 进下一个样品； 注意：实验过程中及时观察溶剂存贮瓶中溶剂量；如需补加，必须在仪器 停止数据采集时（最好在泵流速为 0 时）添加溶剂