一株强裂解性大肠杆菌T1样噬菌体新成员的分离与鉴定.PDFVIP

微生物学通报 Dec. 20, 2017, 44(12): 2782−2794 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.170514 研究报告 一株强裂解性大肠杆菌 T1 样噬菌体新成员的分离与鉴定 傅强 单文雅 王兆飞 李世雨 王恒安 孙建和 严亚贤* (上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室 上海 200240) 摘 要：【目的】自然界中噬菌体种类繁多，其裂菌功能在针对细菌耐药方面具有潜在应用价 值。不同噬菌体也呈现出显著的基因多样性及宿主特异性。从上海某猪场仔猪肠内容物样品中 分离、纯化大肠杆菌的裂解性噬菌体，分析其生物学特性和病毒学特征，为探索应用噬菌体治 疗细菌性感染提供研究材料。【方法】采用双层琼脂平板法分离、纯化噬菌体，观察噬菌斑特 征，通过电镜观察噬菌体形态特征，测定其裂菌谱、最佳感染复数、一步生长曲线和生物学特 性，进行噬菌体全基因组测序和遗传进化分析。【结果】分离、纯化获得一株能高效裂解大肠 杆菌K-12 菌株的噬菌体，命名为vB_EcoS_SH2 (SH2) ，噬菌斑呈圆形、大而透明、边缘整齐。 电镜观察SH2 的头部呈二十面体立体对称，尾部较长。噬菌体的潜伏期为 10 min，暴发期为 60 min ，裂解量高达121 PFU/感染细胞，其最佳感染复数为0.1。基因组测序和比对结果表明， SH2 的核酸类型为dsDNA ，基因组全长为49 088 bp ，G+C%含量为45% ，GenBank 登录号为 KY985004 ，结合电镜观察及BLASTp 分析，确定其属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科成员。同 源性及进化分析表明，该噬菌体为大肠杆菌T1 样噬菌体的新成员。【结论】分离鉴定了一株裂 解效率极高的大肠杆菌T1 样噬菌体，并确认其为T1 样噬菌体新成员，为研究大肠杆菌噬菌体 及其抗菌应用提供了新的实验材料。 关键词：大肠杆菌，T1 样噬菌体，生物学特性，基因组分析 Isolation and characterization of an efficient lytic T1-like phage against Escherichia coli FU Qiang SHAN Wen-Ya WANG Zhao-Fei LI Shi-Yu WANG Heng-An * SUN Jian-He YAN Ya-Xian (Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China) Abstract: [Objective] Bacteriophages are recognized as the most abundant microorganisms on earth, and have potential to control antibiotic-resistant bacterial infections for their bactericidal activity. Foundation item: National Natural