恶性肿瘤-东台人民医院.PPTVIP

* 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 Ct DNA检测技术 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 数字PCR 数字PCR即Digital PCR(dPCR)，它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。 在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今，你无需纠结了，因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 CtDNA临床应用领域 CtDNA作为一种新的肿瘤标志物，将在肿瘤的诊断、治疗及预后检测等方面发挥重要的作用，尤其是对于一些不具有典型临床症状、检查无特异性和诊断困难的肿瘤可避免复杂的、具有创伤性的活检。ctDNA来自肿瘤细胞的体细胞突变，不同于遗传突变的是，遗传突变存在于体内每个细胞。因此，ctDNA是一种特征性的肿瘤生物标记物，并且还可以被定性、定量和追踪。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 不同分期癌症的ctDNA检出情况 不同癌症种类的ctDNA检出情况 一项针对15种癌症进行的ctDNA测序研究显示，在几乎所有种类的癌症中，都检测到了ctDNA所带有的标志性突变，并且肿瘤越晚期，病情越严重，肿瘤的恶性程度越高， ctDNA特有突变的频率就越高。分别有47%，55%，69%，82%的I-IV期癌症病人中能检测到高于一定频率的ctDNA突变。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 检测9名接受特罗凯一线治疗的NSCLC患者血浆中ctDNA的EGFR突变情况，一直到患者进展至PD。 在接受治疗后，所有患者血浆中的含有EGFR突变的ctDNA浓度出现下降，其中8人的EGFR突变完全消失。 有6名患者的血浆中重新检测到EGFR突变的时间要比进展至PD的时间早4个月以上！ 血浆中没有检测到EGFR的3名患者，进展至PD期时，其肿瘤仅在胸腔内有缓慢进展。 现有技术用石蜡组织切片样本只能检测60copies以上的突变含量，但是用液态活检通过数字PCR平台却可以检测0-60copies之间的突变含量，更早的发现病情及耐药性，对于癌症患者如果能提前4个月发现病情的变化，生存率会大大提高。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 ctDNA中PI3KCA的检测可用于预测原发性乳腺癌患者的预后 1. ctDNA有PI3KCA检出的乳腺癌患者，其预后要比没有检出的患者差。 2. ctDNA中PI3KCA拷贝数高的乳腺癌患者，其预后要比拷贝数低的患者差。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 -- NEJM，2013，March 文章主要通过数字PCR比较CtDNA、肿瘤标记物及循环肿瘤细胞三个方法的比较，其中CtDNA灵敏度为97%，循环肿瘤细胞87%，肿瘤标记物灵敏度为78%。 南通大学附属东台医院 东台市人民医院 东台市临床检验中心 * * * * * NO ! * * 1）化学致癌因素 1）间接作用的化学致癌物：多环芳烃，芳香胺类与氨基偶氮染料，亚硝胺类，真菌毒素。 2）直接作用的化学致癌物：这些致癌物不经体内活化就可致癌，如烷化剂与酰化剂。 （1）亚硝胺类，这是一类致癌性较强，能引起动物多种癌症的化学致癌物质。在变质的蔬菜及食品中含量较高，能引起消化系统、肾脏等多种器官的肿瘤。 （2）