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一、随机交配的方法 方法有三种: 按随机数表配对法, 分组交叉交配法 循环配对法 1、按随机数表配对法 将断奶后的小鼠编号,按随机数表组成配种对。 第三节 封闭群的繁育体系 2、分组交叉交配法: ①将被选留的种鼠分组编号后, ♀♂分笼饲养 ②配种时♀♂种鼠应按组别交叉配种, 即1×3、2×4、…… (n一1) ×1,n×2。 ③当n=4时,(n-1)×1即3×1,配对后组成A,B,C,D四组,见图6-2。 ④再将A,B,C,D四组生下的小鼠分别按顺序定为1,2、3,4重复上面的循环。 1 2 3 4 D C B A 4 3 2 1 雄鼠组号 雌鼠组号 子代组号 图6-2 分组交叉交配法示意图 3、循环配对法: 每盒仅饲养1对种鼠,每代种鼠的对数相等,每盒种鼠在下个世代中仅留1对后代,可以想像成按一个圆圈排列,每个盒子包含1对第n代的小鼠,下一个循环称为n+1代,子代♀♂分别进入它下一个循环对应编号邻近的笼子里,即♂鼠按逆时针方向循环,♀鼠按顺时针方向循环 例如♂鼠按1 n,2 2-1…… n n-1 ♀鼠则按1 1+1, 2 2+1……(n-1) n,n 1 ,见图5-3 公1 母 公 4 母 公 3 母 公 5 母 公 2 母 公 1 母 公 2 母 公 4 母 公 3 母 公 5 母 n 代 n+1代 图6-3 循环配对法示意图 二、封闭群的维持与生产 封闭群动物的繁殖是尽量保持封闭群动物基因异质性及多态性,避免随繁殖代数增加,导致近交系数的过快上升。 封闭群可来源于非近交系,也可来源于近交系的繁殖群及其子代、而不采用近交。 著名的封闭群有NIH、ICR,LACA、Swiss和ddN小鼠,Wistar、SD大鼠,HarHey豚鼠等 1、引种原则 ① 作为原种的封闭群动物必须遗传背景明确,来源清楚,有完整资料(包括种群名称、来源、遗传基因特点及主要生物学特性等)。 ②为保持封闭群动物的遗传异质性及基因多态性,引种动物数量要足够多,小型啮齿类封闭群动物引种数目一般不少于25对。 2、繁殖原则 为保持封闭群动物的遗传基因的稳定,封闭群应足够大,并尽量避免近亲交配。根据封闭群的大小,采用循环交配法等方法进行繁殖,以确保每代近交系数上升不超过1%。 3、方法的选择 ①当封闭群中每代交配的公鼠为10-25只时,一般采用循环交配法。 ②当封闭群中每代交配的公鼠为26-100只时,一般采用循环交配法或分组交配法。 ③当封闭群中每代交配的公鼠为100只以上时,一般采用随机交配法或分组交配法。 近交系数的增长率(ΔF): 对于封闭群来说,近交系数的增量即ΔF值愈低愈好,每代ΔF应低于1%,ΔF值与核心群动物数量与配种方式有关,其计算方法如下: 1、循环交配法 ① 当公母数不等时: ΔF = 1/16×N♀+1/16×N♂ (N:动物数) ② 当公母数相等时: ΔF = 1/4×N总 ③举例 已知每代核心群种鼠N♂13只,N♀13只,采用循环交配法,求ΔF=? ΔF=1/4×N总 = 1/4×26=0.009615=0.96 %(<1%) 2、随机交配: ①公母数不等时 ΔF = 1/8×N♀ +1/8×N♂ ②公母数相等时 ΔF = 1/2×N总 ③举例 已知随机交配的鼠群有25对种鼠,求ΔF=? 解:ΔF = 1/2×N总=1/2 × 50=1% 由此说明同样的ΔF,采用循环交配法留种少※ 实验动物的F1代与一般育种学上的F1代有着较大的差异。 一般育种学上的F1代,其个体之间差异较大,而实验动物的F1代虽然也是杂种,但它们个体之间十分均一,即基因型与表型是一致的。 可以用于科学研究的领域,获得正确的实验结果。 第四节 杂交F1代的培育 P AA × aa Aa F1 Aa × Aa ? ? AA Aa aa 1 : 2 : 1 由此可见F1代的培育必须同时保持两个杂交用的近交系品系。 F1代动物生产中必须强调的是两个近交系不同的性别组合,有可能对实验结果会产生较大的影响。例如: C3H(♀)×C57BL/6J(♂) C3B6F1 C57BL/6J(♀)×C3H(♂) B6C3F1 乳腺癌的发病率
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