掌握鱼类血红蛋白测定的原理和方法.pptVIP

实验四 鱼类血红蛋白含量测定 【目的要求】 掌握鱼类血红蛋白测定的原理和方法。 【基本原理】 测定血红蛋白含量的方法有多种。最常用的是沙利氏比色法。其原理是将少量稀盐酸加入一定量血液，使血红蛋白的亚铁血红素变为高铁血红素，使溶液呈现稳定的棕黄色。用水稀释后与标准色管比较，即可直接读出每100ml血液中所含的血红蛋白克数。 【动物与器材】 鱼，血红蛋白计（Shali氏）1套，0.1mol／L盐酸（或1％盐酸）、蒸馏水、95％酒精，乙醚、滴管、小玻棒、棉球。 沙利氏血红蛋白计 沙利氏血红蛋白计主要有吸血管、比色计和比色管等部件（下图）。吸血管为一厚壁毛细玻璃管，其上有一20mm3（即20μl）的刻度，尾端膨大，上面套上顶端有孔的橡皮帽或套上胶管，供吸血用。比色计的一侧（或两侧），装有标准色玻璃管，比色管则可插在比色计中。与其一侧（或两侧）的标准色进行比色。比色管的两侧有两行刻度，一行为血红蛋白量的绝对值，表示每100ml血液中所含血红蛋白克数（g%），由2至20为止；另一行为血红蛋白相对值，表示相当正常平均值的百分比（%）。由20起至160止。人用的比色计是以100ml血液中含有血红蛋白14.5g为100％。本实验以绝对值（g/%）来表示为宜。 图1 沙利氏血红蛋白计 【方法与步骤】 1．准备盐酸：用滴管吸取0.1mol/L盐酸，滴5～6滴入刻度比色管内（约加到管下端刻度2处）。