GB/T 23882-2009饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯的测定　高效液相色谱法.pdf

ICS 65. 120 B 46 OB 中华人民共和国国家标准 GB/T 23882—2009 饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯的测定 高效液相色谱法 Determination of L-ascorbyl-2-monophosphate in feeds — High performance liquid chromatography 2009-05-26 发布 2009-10-01 实施 发布 GB/T 23882—2009 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC 76）提出并归口。 本标准起草单位 ：国家饲料质量监督检验中心 （武汉）、北京桑普生物化学技术有限公司、帝斯曼维 生素 （上海）有限公司。 本标准主要起草人:屈利文、施文娟、虞哲高、杨海鹏、何凤琴、黄婷。 T GB/T 23882—2009 饲料中L■抗坏血酸-2■磷酸酯的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯的高效液相色谱检测方法。 本标准适用于水产用配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯含量的测定， 方法检出限为2 mg/kg（以L-抗坏血酸计），定量限为10 mg/kg（以L-抗坏血酸计）。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注日期的引用文件 ，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699. 1 饲料采样 GB/T 20195动物饲料试样的制备 3原理 试样中的L-抗坏血酸-2-磷酸酯用磷酸盐缓冲溶液提取，离心，过滤，过滤液用高效液相色谱仪进行 测定,外标法定量。 4试剂和溶液 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682规定的二级水的水。 4. 1甲醇：色谱纯。 4.2磷酸。 4.3磷酸二氢钾。 4.4四丁基硫酸氢钱。 4.5磷酸盐缓冲溶液：54 g磷酸二氢钾溶于900 mL水中，用磷酸 （4. 2）调至pH3. 0后，用水稀释 至 1 000 mLo 4.6流动相：称取6. 8 g磷酸二氢钾（4. 3）,0. 5 g四丁基硫酸氢钱（4. 4）,置于1 000 mL容量瓶中，加 入约700 mL水，待全部溶解后，加入75 mL甲醇（4. 1）,用水定容至刻度，摇匀，过0. 45 滤膜，超声 脱气。 4.7 L-抗坏血酸-2-磷酸酯标准储备液（以L-抗坏血酸计= 100 卩g /mL）：准确称取三-环己胺-抗坏血 酸-2-磷酸酯 Ctris-（cyclohexyl-ammonium）ascorbic acid-2-phosphateZ）（C24 H48 N3（）9P 纯度＞99. 0%）标 准品0. 015 8 g （标准品以L-抗坏血酸计，换算因子为0. 318 4）用磷酸盐缓冲溶液 （4. 5）溶解并定容于 50 mL棕色容量瓶中 。保存在4 C冰箱中，有效期一个月。 4.8 L-抗坏血酸-2 -磷